閉口筋筋紡錘及び歯根膜機械受容器を支配する三叉神経中脳路核ニューロンへの入力様式

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コネキシン(Cx)ファミリーはギャップジャンクションを形成するタンパク質であり多くの脊椎動物の組織に広く認められている。ギャップジャンクションは神経回路の発達において重要な役割を果たすことが近年の研究より明らかとなってきた。これまでに16種類のコネキシンタンパクが報告されているが、その中でも発育中あるいは成獣マウスの脳に認められる主なものとしてCx26,32,36,43が挙げられている。本年度の研究ではこの4種類の抗体を用いた免疫電顕を行い、コネキシンタンパクの細胞内での分布様式を検索するとともに、幼若動物でのギャップジャンクションの存在を明らかにする。動物は生後1、6、14、21日齢および成獣マウスを用いた。三叉神経中脳路核および運動核を含む断面の切片を作製し、Cx26,32,36,43に対するポリクロナル抗体を用いて免疫組織化学的検索を行い光学顕微鏡ならびに電子顕微鏡にて観察した。Cx32は三叉神経中脳路核ニューロン、三叉神経運動ニューロンともに幼若動物では約5割のニューロンに認められ、その後成長に伴って陽性細胞の割合はさらに増加した。Cx26,36,43は逆に幼若ニューロンに多く認められ、成長に伴って陽性細胞の割合は減少した。電子顕微鏡による観察の結果、Cx26,36はニューロンの細胞体全体に広く陽性反応が認められた。Cx32は細胞体および核内にも陽性反応が認められ、Cx43は細胞体内に弱い陽性反応と、核内に強い陽性反応が認められた。また咬筋に逆行性トレーサーを注入し、標識されたニューロンを電子顕微鏡にて観察することにより、生後5日齢の咬筋運動ニューロン間でのギャップジャンクションの存在が形態学的にも明らかとなった。以上のことより、コネキシンタンパクの細胞内における局在はisoformの違いにより異なること、また成長とともに強く発現するisoformの種類も異なることが示唆された。