分裂酵母における接合型変換と組換え(修復)機構

裂殖酵母的交配型转换和重组（修复）机制

• 批准号: 01J01096
• 负责人: 赤松 由布子
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J01096/
• 关键词: 相同組換え; DNA修復; 接合型変換; Rad51; swi5; 分裂酵母; 組換え修復; Swi5; rhp51

DNA相同組換えは、減数分裂期にゲノムに多様性をもたらすのみならず、様々な要因によって生じるDNA損傷を修復する重要な生物機能の1つであるRad51は組換え反応を触媒し、大腸菌から人まで高度に保存されている重要なタンパク質である。これまでに私は、分裂酵母において接合型変換、DNA修復、減数分裂期組換えに関わるswi5遺伝子の解析を行い、Rad51 (Rhp51)依存的組換え修復経路において、Swi5依存的経路を新しく同定した。また、Swi5が接合型変換時にはSwi2と、DNA修復時にはSfr1と複合体を形成し、Rad51 (Rhp51)による組換え反応を促進していることを明らかにした。この結果を、2003年12月23日号のProceedings of the National Academy of Sciences of the United States of Americaに発表した。さらに、Swi5の機能を詳細に調べるために、細胞内でSwi5-EGFP融合タンパク質を発現し、細胞内局在を観察した。Swi5-EGFPは核に局在し、さらに核内で数個のfociを形成していた。Heterochromatin protein 1 (HP1)の分裂酵母ホモログであるSwi6をECFPと融合し、Swi5-EGFPとの共局在を調べたところ、Swi5-EGFPとSwi6-ECFPが共局在し、Swi5がヘテロクロマチン領域に局在することが分かった。これまでの実験結果から、Swi5がSwi2を介してSwi6と相互作用すること、Swi2-EGFPが核内で数個のfociを形成することが明らかになっている。これらのことから、ヘテロクロマチン領域ではSwi5-Swi2-Swi6の複合体が形成され、何らかの機能を担っていることが予想される。一方、Swi5-EGFPは、紫外線照射後に細胞内で新たにfociを形成した。またSfr1-EGFP融合タンパク質も紫外線照射後に細胞内でfociを形成した。多くの相同組換えに関わるタンパク質についてDNA損傷部位に結合することが報告されているため、Swi5がSfr1と共にDNA損傷部位に局在している可能性が考えられる。

DNA identical group replacement, meiosis phase polymorphism, polymorphism, 様々なfactory, DNA damage, repair, re-repair It is necessary to use the biological function of Rad51, the replacement of the reaction catalyst, and the high preservation of coliform and the important quality of the coliform.これまでにprivate, fission yeast において conjugative replacement, DNA repair, meiotic phase group replacement えに关わるswi5 伝子のanalytic を行い, Rad51 (Rhp51) Dependence on the group replacement and restoration of the road, and Swi5 dependence on the new road and the same setting.また, Swi5 ligation type replacement time にSwi2 と, DNA repair time にSfr1 と complex formation し, Rad51 (Rhp51) による合组 え Reflection を Promotion していることを明らかにした. The result is the Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, December 23, 2003.さらに, Swi5's function has been adjusted in detail, the Swi5-EGFP fusion in the cell has been detected, and the intracellular localization has been monitored. Swi5-EGFP has a nuclear localization and several foci within the nucleus. Heterochromatin protein 1 (HP1) fission yeast Swi6 ECFP fusion, Swi5-EGFP colocalization in the tune, Swi5-EGFP and Swi6-ECFP are in common, and Swi5 is in the same field.これまでの実験 Resultsから、Swi5がSwi2を IntroductionしてSwi6とInteractionすること, Swi2-EGFP has several のfoci formed in the nucleus. Swi5-Swi2-Sw in the field of Swi5-Swi2-Sw The i6 complex is formed, and the functions of the i6 complex are assumed to be the same. On the one hand, Swi5-EGFP and new foci are formed in cells after ultraviolet irradiation. The Sfr1-EGFP fusion protein is fused to a cell and is formed in the cell after ultraviolet irradiation.くの Same group replacement えに关わるタンパク性についてDNA damage site にcombination することが report されてThe possibility of DNA damage at the site of damage to the DNA of Swi5 and Sfr1 is tested.

项目成果

Kato A, Akamatsu Y, Sakuraba Y, Inoue H.: "The Neurospora crassa mus-19 gene is identical to the qde-3 gene, which encodes a RecQ homologue and is involved in recombination repair and postreplication repair"Curr Genet.. 45(1). 37-44 (2004)

Kato A、Akamatsu Y、Sakuraba Y、Inoue H.：“粗糙脉孢菌 mus-19 基因与 qde-3 基因相同，后者编码 RecQ 同源物并参与重组修复和复制后修复”Curr Genet.. 45

Akamatsu Y, Dziadkowiec D, Iikeguchi M, Shinagawa H, Iwasaki H: "Two different Swi5-containing protein complexes are involved in mating-type switching and recombination repair in fission yeast."Proceedings of the National Academy of Sciences of the United

Akamatsu Y、Dziadkowiec D、Iikeguchi M、Shinakawa H、Iwasaki H：“两种不同的含有 Swi5 的蛋白质复合物参与裂殖酵母的交配型转换和重组修复。”美国国家科学院院刊

Ueno M, Nakazaki T, Akamatsu Y, Watanabe K, Tomita K, Lindsay HD, Shinagawa H, Iwasaki H.: "Molecular characterization of the Schizosaccharomyces pombe nbsl+ gene involved in DNA repair and telomere maintenance."Mol Cell Biol.. 8(9). 721-730 (2003)

Ueno M、Nakazaki T、Akamatsu Y、Watanabe K、Tomita K、Lindsay HD、Shinakawa H、Iwasaki H.：“参与 DNA 修复和端粒维持的粟酒裂殖酵母 nbsl 基因的分子特征。”Mol Cell Biol.. 8（

Tomita K, Matsuura A, Caspari T, Carr AM, Akamatsu Y, Iwasaki H, Mizuno K, Ohta K, Uritani M, Ushimaru T, Yoshinaga K, Ueno M.: "Competition between the Rad50 complex and the Ku heterodimer reveals a role for Exo1 in processing double-strand breaks but no

Tomita K、Matsuura A、Caspari T、Carr AM、Akamatsu Y、Iwasaki H、Mizuno K、Ohta K、Uritani M、Ushimaru T、Yoshinaga K、Ueno M.：“Rad50 复合物和 Ku 异二聚体之间的竞争揭示了一个作用