細胞内におけるFGF-1の機能と性状解析

目的)Fibroblast growth factor(FGFs)は22種類からなるファミリーを形成しており、広範な組織で発現が認められ多彩な役割をもつポリペプチド性の増殖因子である。そのなかでFGF-2,-10は脂肪細胞の分化や増殖を調節することが報告されているがその分子メカニズムについては明らかではない。本研究においては、脂肪細胞の分化モデルとして用いられるマウス株化前駆脂肪細胞3T3-L1細胞への分化に対するFGF-1,-2の影響とそのメカニズムについて検討した。内容)脂肪細胞分化誘導因子カクテル(Insulin, IBMX, Dexamethasone)添加前もしくは添加後のFGF-1添加による脂肪細胞分化抑制メカニズムを解析するためにFGF・Receptor-1の阻害剤とされるSU5402、MEKキナーゼ阻害剤であるU0126、ストレス性MAPKであるp38キナーゼ阻害剤SB203580などを用いたのち、Oil Red O染色による観察、脂肪細胞分化特異的マーカーであるAdipsin、C/EBPα、C/EBPβ、PPARγの遺伝子発現レベル及び蛋白レベルでの解析をおこなった。結果)分化誘導前および分化誘導後のFGF-1添加により脂肪細胞分化が濃度依存的に抑制することがoil Red O染色による観察結果及び、脂肪細胞分化特異的マーカーの発現低下により分かった。各種阻害剤を用いた検討から1)分化誘導後のFGF-1添加による脂肪細胞分化抑制機構はFGF Receptor-1を介しているがMFKキナーゼ、p38キナーゼには依存しない経路で脂肪細胞分化を抑制している。2)FGF-1前処理による脂肪分化抑制メカニズムはMEKキナーゼ依存的であるがp38を介さない経路により脂肪細胞を分化抑制することを見い出した。(論文投稿準備中)

目的)Fibroblast growth factor(FGFs)は22種類からなるファミリーを形成しており、広範な組織で発現が認められ多彩な役割をもつポリペプチド性の増殖因子である。そのなかでFGF-2,-10は脂肪細胞の分化や増殖を調節することが報告されているがその分子メカニズムについては明らかではない。本研究においては、脂肪細胞の分化モデルとして用いられるマウス株化前駆脂肪細胞3T3-L1細胞への分化に対するFGF-1,-2の影響とそのメカニズムについて検討した。内容)脂肪細胞分化誘導因子カクテル(Insulin, IBMX, Dexamethasone)添加前もしくは添加後のFGF-1添加による脂肪細胞分化抑制メカニズムを解析するためにFGF・Receptor-1の阻害剤とされるSU5402、MEKキナーゼ阻害剤であるU0126、ストレス性MAPKであるp38キナーゼ阻害剤SB203580などを用いたのち、Oil Red O染色による観察、脂肪細胞分化特異的マーカーであるAdipsin、C/EBPα、C/EBPβ、PPARγの遺伝子発現レベル及び蛋白レベルでの解析をおこなった。結果)分化誘導前および分化誘導後のFGF-1添加により脂肪細胞分化が濃度依存的に抑制することがoil Red O染色による観察結果及び、脂肪細胞分化特異的マーカーの発現低下により分かった。各種阻害剤を用いた検討から1)分化誘導後のFGF-1添加による脂肪細胞分化抑制機構はFGF Receptor-1を介しているがMFKキナーゼ、p38キナーゼには依存しない経路で脂肪細胞分化を抑制している。2)FGF-1前処理による脂肪分化抑制メカニズムはMEKキナーゼ依存的であるがp38を介さない経路により脂肪細胞を分化抑制することを見い出した。(論文投稿準備中)