塩化コバルト(II)六水和物が誘導するアポトーシスと塩化亜鉛との関係

六水氯化钴与氯化锌诱导细胞凋亡的关系

• 批准号: 13771075
• 负责人: 桑原 三千代
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771075/
• 关键词: アポトーシス; 塩化コバルト; 塩化亜鉛; 骨芽細胞; 唾液腺細胞; Bcl-2; 培養細胞; bcl-2; bax; ウェスタンブロッティング; RT-PCR

骨芽細胞の性質を有するヒト骨肉腫細胞(Saos-2細胞とMG63細胞)およびヒト唾液腺癌細胞(HSG細胞)を塩化コバルト(II)六水和物で処理すると,これらの細胞は球形に変化してシャーレより浮遊し,ミトコンドリア活性が急激に減少して,細胞は死に至った。この細胞死はクロマチンの凝集と核の断片を伴い典型的なアポトーシスによる細胞死であった。さらに塩化コバルト(II)六水和物は濃度および時間に依存してこれらの細胞のDNAラダー形成を誘導し,その至適濃度と処理時間は0.5mMと24時間であった。これらの細胞に0.5mMの塩化コバルト存在下で,塩化亜鉛を加え培養すると,塩化亜鉛は塩化コバルトにより誘導されるアポトーシスを濃度と時間に依存して回復し,その至適濃度は50μMであった。さらに,Western BlottingとRC-PCR法により,塩化コバルトはBcl-2蛋白とbcl-2遺伝子の発現を抑制することが明らかになった。ところが,塩化亜鉛は塩化コバルトにより抑制されるBcl-2蛋白とbcl-2遺伝子の発現を濃度と時間に依存して回復し,その至適濃度は50μMであった。さらに,塩化コバルトによるアポトーシスとBcl-2蛋白の発現低下は,50μMのシステインにより回復した。以上の結果は塩化コバルトによるアポトーシスにはBcl-2蛋白が関与し,塩化亜鉛とシステインよるアポトーシス抑制はBcl-2蛋白の発現が関与することをしめす。さらに以上の結果は塩化コバルトによるアポトーシスとBcl-2蛋白の抑制には細胞内の活性酸素が関与し,塩化亜鉛やシステインによる活性酸素の除去により,アポトーシスが回避されることを示唆している。現在これらの成果の一部を論文にまとめ,投稿中である。

Bone bud cells の nature を す る ヒ ト flesh swollen cells (Saos - 2 cells と MG63 cells) お よ び ヒ ト salivary gland cells (HSG) cells を salt chemical コ バ ル ト six water and (II) content で 処 Richard す る と, こ れ ら は spherical に の cells - the し て シ ャ ー レ よ り planktonic し, ミ ト コ ン ド リ ア activity が nasty shock に reduces し て, は cells Die に to った. <s:1> <s:1> <s:1> cell death ロ チ <s:1> <s:1> agglutination と nuclear <s:1> fragment を accompanied by であった typical なアポト シスによる シスによる シスによる cell death であった. さ ら に salt chemical コ バ ル ト six (II) concentration and water content は お よ に び time dependent し て こ れ ら の の cell DNA ラ ダ ー を induced し formation, そ の to optimum concentration と 処 manage time は 0.5 mM と 24 で あ っ た. こ れ ら の cells に 0.5 mM の salt chemical コ バ ル ト で, in the presence of salt 亜 lead を plus え fostering す る と, salt chemical は 亜 lead salt chemical コ バ ル ト に よ り induced さ れ る ア ポ ト ー シ ス を concentration と time に dependent し て reply し, そ の to optimum concentration は 50 microns で あ っ た. さ ら に, Western Blotting と RC - PCR method に よ り, salt chemical コ バ ル ト は Bcl - 2 protein と traces of the Bcl - 2 伝 son の 発 now を inhibit す る こ と が Ming ら か に な っ た. と こ ろ が, salt は 亜 lead salt chemical コ バ ル ト に よ り inhibit さ れ る Bcl - 2 protein と traces of the Bcl - 2 伝 son の 発 を concentration と time now に dependent し て reply し, そ の to optimum concentration は 50 microns で あ っ た. さ ら に, salt コ バ ル ト に よ る ア ポ ト ー シ ス と Bcl - 2 protein の 発 は low now, 50 microns の シ ス テ イ ン に よ り reply し た. の above results は salt chemical コ バ ル ト に よ る ア ポ ト ー シ ス に は Bcl - 2 protein が masato and し, lead salt melt 亜 と シ ス テ イ ン よ る ア ポ ト ー シ ス inhibit は Bcl - 2 protein の 発 now が masato and す る こ と を し め す. さ ら に の above results は salt chemical コ バ ル ト に よ る ア ポ ト ー シ ス と Bcl - 2 protein の inhibit に は の acid active element in the cell が masato and し, lead salt melt 亜 や シ ス テ イ ン に よ る acid active element の remove に よ り, ア ポ ト ー シ ス が avoid さ れ る こ と を in stopping し て い る. Now there is a を paper にまとめ in れら れら, and it is being submitted である.