Telomeraseによる口腔領域前癌病変の早期評価と治療への応用の検討

端粒酶对口腔癌前病变的早期评估及其在治疗中的应用

• 批准号: 13771088
• 负责人: 三好 代志子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kanagawa Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771088/
• 关键词: Telomerase; hTERT; TRF; TRAP; in situ TRAP

口腔粘膜上皮に発生する前癌病変、特に白板症・紅板症等に注目しTelomerase活性と関連遺伝子などを調べ組織学的所見と対比して良・悪性の境界病変の判定にどのように役たつか検討した。またTelomeraseを標的したそれら前癌病変の治療の可能性を検索した。ヒト口腔領域原発の前癌病変組織において、(1)Telomerase活性の有無と発現強度を調べた。(2)Telomerase関連遺伝子の(hTERT遺伝子など)発現を見た。(3)In situ PCRによるTelomerase活性の微量検出法を試みた。(4)アポトーシス関連遺伝子(p53遺伝子・bcl-2遺伝子)の発現を見た。病理組織学的診断と対比することより、口腔領域に発生する前癌病変の良・悪性の早期診断に役立つものはどれかを、明らかにした。1)生検および手術にて得られた口腔領域の前癌病変組織を、病理組織学的に判定した。2)同時に採取した各新鮮組織よりDNA・RNAを抽出し、また核抽出液も作製した。これを用いて、 (a)Telomere長TRFをサザンブロット法にて測定した。(b)ヒトTelomerase逆転写酵素hTERT(human telomerase reverse transcriptase)・ヒトTelomerase付属蛋白質hTRF1/2(human telomerase repeat binding facter1/2)とアポトーシス関連遺伝子(p53遺伝子・bcl-2遺伝子)の発現をRT-PCR法にて測定した。(c)PCR-プライマーエクステンションによるTelomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay法でTelomerase活性を測定するしたitu TRAP法を行いTelomerase活性の細胞レベルでの発現の有無を調べた。口腔領域白板症・紅板症等においてTelomerase活性と組織学的所見と対比して良・悪性の境界病変の判定に有用で早期前癌病変の治療への可能性が期待できる事を示唆した。

Telomerase activity is of great concern in the development of oral mucosal epithelium, precancerous diseases, leukemia, and erythroblastosis. The findings of histology are as follows: The findings of histology are better than those of others.またTelomeraseをtargetedしたそれらprecancerous disease 変のtreatment possibilityを検SOした.ヒトThe original precancerous tissue in the oral cavity is において, (1) The presence or absence of telomerase activity and the current intensity are adjusted. (2)Telomerase is related to hTERT 缝子など). (3) In situ PCR is used to test the Telomerase activity using a micro-extraction method. (4) アポトーシス缝子 (p53 伝子・bcl-2 伝子) の発见を见た. The diagnosis of pathological histology is as follows: early diagnosis of precancerous disease in the oral cavity, early diagnosis of precancerous disease as early as possible, and clear diagnosis of cancer. 1) The surgical procedure was performed to determine the precancerous tissue and pathological histology of the oral cavity. 2) At the same time, each fresh tissue is collected, DNA and RNA are extracted, and the nuclear extract liquid is produced.これを Use いて, (a) Telomere long TRF をサザンブロット method にて measure した. (b) Telomerase reverse transcriptase hTERT (human telomerase reverse transcriptase) and Telomerase affiliated protein hTRF1/2 (human telomerase repeat binding facter1/2) The related test results of p53 test and bcl-2 test are measured by RT-PCR method. (c) PCR-Telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay method for measuring Telomerase activity The TRAP method is used to adjust the presence or absence of cells with Telomerase activity. In the oral field, leukocoria, erythroblastosis, etc. are better than Telomerase activity and histological findings.・The determination of the symptoms of boundary diseases, the usefulness of early stage precancerous diseases, the possibility of treatment, and the expectations and expectations.

项目成果

Yoshiko Miyoshi, Tsutomu Ishizaki, Yuuichi Sasakura, Yoshihisa Watanabe: "Detecion of Telomerase Activity in Oral Precancerous Lesion and Squamous Cell Carcinoma Using the in situ Trap Assay"ORAL ONCOLOGY. VOLUME VII. 524-528 (2001)

Yoshiko Miyoshi、Tsutomu Ishizaki、Yuuichi Sasakura、Yoshihisa Watanabe：“使用原位 Trap 测定检测口腔癌前病变和鳞状细胞癌中的端粒酶活性”口腔肿瘤学。