造血幹細胞の転写因子GATA-2の転写調節機構と発癌

转录因子GATA-2在造血干细胞中的转录调控机制与癌变

• 批准号: 02J06024
• 负责人: 小林 牧 (大崎 牧)
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J06024/
• 关键词: GATA-2; GFP蛋白質; トランスジェニックマウス; 造血幹細胞; GFPレポータータンパク質; 温度感受性T抗原; 遺伝子破壊マウス; 遺伝子発現制御領域

造血幹細胞の自己複製維持に必要と考えられる転写因子GATA-2の発現制御機構を解析した.GATA-2遺伝子の発現をGFPレポーター蛋白質で解析可能なトランスジェニックマウスを作成し,9.5日胚,13.5日胚において,それぞれpara-aortic splanchnopleura,胎児肝でのGFP遺伝子の発現を解析した.その結果,GATA-2遺伝子の転写制御に必須なシスエレメントを複数同定することに成功した.9.5日胚についてはGATA因子が大きく貢献するエレメントを同定し,報告した.他の2つについては,胎児肝を用いたIn vivo footprinting法によっても何らかの結合因子が生体内で機能している可能性が示された.現在,クロマチン免疫沈降法によって,その領域に結合する因子の同定を進めている.また,トランス因子の絞り込みが難しいエレメントについてはOne-hybrid法を行っている.現在までに機能している可能性のある候補因子として同定したもののうち,2つについては造血幹細胞レベルで機能していることが既報により報告されているが,他の一つの因子については,未だ造血幹細胞での機能は報告されておらず,新規に造血幹細胞の活性を左右しうる因子を同定した可能性がある.これらの発現過剰状態や抑制状態をレトロウイルスベクターを用いて作製し,細胞株において検討することは生体での造血細胞形成の試験管内制御モデルの実現にむけての.今後の課題である.

Analysis of the regulatory mechanism of GATA-2 gene expression in hematopoietic stem cells. Analysis of GATA-2 gene expression in GFP protein. As a result, the GATA-2 gene has been successfully controlled by the GATA factor. In vivo footprinting method, the binding factors of fetal liver are used to show the possibility of function in vivo. Now, the immunoprecipitation method is used to determine the identity of the binding factors in all fields. The One-hybrid method is applied to a variety of applications. Now the function of hematopoietic stem cells is not reported. The activity of hematopoietic stem cells is not reported. The activity of hematopoietic stem cells is not reported. The development and inhibition of the cell line in vitro control of hematopoietic cell formation in vivo. Future issues.