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眼科領域の難治性疾患の病態解明と治療を目標にした糖鎖生物学的研究

糖生物学研究旨在阐明眼科领域的病理学和治疗疑难杂症

基本信息

批准号：
13671844
负责人：
上原文行
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ガレクチン3を用いた視細胞変性抑制研究:ラクトースカラムに結合しうるリコンビナントガレクチン3を、大腸菌に産生させる研究を進めた。2.将来の視細胞移植に向けた基礎的研究:ヒトMLGAPC(視細胞関連ムチン様糖蛋白)コア蛋白のcDNAを導入した網膜芽細胞腫Y79培養細胞(平成12年度に樹立)を、他の細胞外成分と相互作用させて、分化の有無などの細胞形態の変化について検索した。ヒアルロナン、シアル酸結合レクチンを培地に加えても、Y79培養細胞の形態にとくに変化はみられなかった。一方、ヒトMLGAPCコア蛋白のcDNAを導入したY79培養細胞は、導入してない細胞に比較して、レチノイン酸による細胞形態の変化の程度に差が検出された。即ち、MLGAPCコア蛋白のcDNAを導入した細胞の方が、レチノイン酸の添加によって、互いに集合形態をとる頻度が高くなることが明らかになった。レチノイン酸の添加によってY79培養細胞で産生されるようになった成分と相互作用することによって、MLGAPCは細胞間接着に関与する可能性が示唆された。今後、このMLGAPCと相互作用する成分を特定する必要がある。またMLGAPCは、病理免疫組織化学的研究によって、ヒト網膜芽細胞腫の分化の程度を判定するためのマーカーになりうることを明らかにした。3.シアル酸転移酵素、フコース転移酵素のcDNA分離と発現分布の解析研究:ヒトα2,3、及びα2,6シアル酸転移酵素のcDNAを、既知の塩基配列からデザインしたプライマーを用いたPCRによって分離し、これらのcDNAをpMALC2およびpGSTの蛋白発現ベクターに組み込んで、リコンビナントシアル酸転移酵素蛋白を合成し、さらにこれらの蛋白を家兎に免疫して作成した抗血清を、アフィニティ精製して抗体を作成することに成功した。これらの抗体を用いた網膜視細胞と腫瘍組織の免疫組織化学的研究を進めた。

1. The study of sexual inhibition was carried out in the first place. The study of sexual inhibition was carried out in combination with the study of biological inhibition of bacteria. two。 Future studies on cell transplantation to target genes: the MLGAPC protein cDNA was introduced into the membrane bud cell Y79 cell (established in Pingcheng 12), the extracellular components of other cells interact with each other, and the differentiation is characterized by cellular morphology and morphological transformation. The combination of acid and acid is necessary to increase the number of cells in the earth, and to increase the temperature in the cells of Y79. On the one hand, MLGAPC the protein cDNA into the cell of Y79, the cell of the cell, the degree of cytopathization, the difference of the cell shape. That is, the MLGAPC protein cDNA is added to the cell, the acid is added to the cell, and the assembly shape is high. The interaction between the components of the Y79 cell, the interaction of the components of the cell, the possibility of the interaction between the cell and the cell of the cell, the interaction between the cell and the cell. In the future, the interaction between MLGAPC and components is specific and necessary. The study of MLGAPC, histopathology and immunocytochemistry were used to determine the degree of differentiation of network germ cells and the degree of differentiation. 3. The analytical study on the present distribution of transferases, cDNA isolates and pGST isolates: α 2meme 3, and α 2meme 6. The enzyme transferase cDNA, known as the base configuration, was used to isolate the enzyme, cDNA, pMALC2, pGST, protein, and so on. Antiserum, antiserum, antibody, antiserum, antiserum, antibody, antiserum, antibody. The study of immuno-histochemistry of anti-human antibodies has been improved by using the tissue of membrane-watching cytoskeleton.