根粒菌RpoH(熱ショックシグマ因子ホモログ)の共生窒素固定における役割

根瘤菌 RpoH(热休克因子同源物)在共生固氮中的作用

基本信息

  • 批准号:
    13760054
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.54万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2001
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2001 至 2002
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

マメ科植物における根粒菌の細胞内共生の分子機構解明に向けて、アルファルファ根粒菌S. melilotiの共生必須な新規RNAポリメラーゼ・シグマ因子であるRpoH_1の解析を通じて、新規共生遺伝子の探索を試みた。主要な窒素固定遺伝子nifH、fixN、nifAについて、lacZとの融合遺伝子をそれぞれ作成し発現パターンを解析したところ、rpoH_1変異株でも野生株と同様の微好気条件に伴う発現誘導が観察された。すなわち、RpoH_1の制御下の共生必須遺伝子は、既知の窒素固定遺伝子とは別ものである可能性が高いと判断した。一方,前年度に示した、60-100kDaの数種類のHsp合成の熱ショック誘導へのRpoH_1の関与に基づき、ゲノム上に見出される9個のHspホモログの転写パターンを解析した。その結果、groESL_5、lon、clpBの3遺伝子において、RpoH_1依存・熱ショック誘導の転写を見出し、更にそのプロモーターコンセンサスを推定することができた。しかし、lonとclpBについては、その転写全体に占めるRpoH_1依存度が小さいこと、groESL_5とclpBの遺伝子破壊株は正常な共生能を示したこと等から、この3つはいずれもrpoH_1変異株のFixの原因遺伝子ではないと判断した。S. melilotiゲノム中に存在する、その他Hspホモログについて、上記プロモーターコンセンサス類似の配列を検索したが、見つかってこなかった。そこで、次にS. meliloti全DNAの3-4kb制限酵素部分消化物をもとに、発現プラスミドベクターを用いて作成したゲノムライブラリーをrpoH_1変異株に導入し、得られた形質転換体をアルファルファに接種することにより、Fix^+株のスクリーニングを試みた。現在までに約50,000個の形質転換体を調べたが、Fix^+は得られなかった。
Molecular Mechanism of Intracellular Symbiosis of Rhizoctonia sp. in Plants of the Family Rhamnospora sp. Meliloti symbiosis must be new RNA diversity factor analysis, new symbiosis gene exploration NifH, fixN, nifA, lacZ, and fusion genes were detected under microclimate conditions. The probability of occurrence of symbiosis under the control of RpoH_1 is high. In the previous year, the relationship between RpoH_1 and RpoH_1 in the synthesis of several Hsp species of 60-100kDa was analyzed. The results show that the three genes of groESL_5, lon, clpB, RpoH_1, RpoH_2, RpoH_3, RpoH_4, RpoH_5, RpoH_3, RpoH_4, RpoH_5, RpoH_4, RpoH_5, RpoH_5, RpoH_6, RpoH_7, RpoH_7, RpoH_8, RpoH_9, Rpo For example, if a plant has a normal symbiotic energy, it can be identified as the root cause of a plant's heterosis. S. Meliloti: There is no such thing as a list of names, names, etc. in the list.そこで、次にS. The 3-4kb restriction enzyme partial digest of meliloti whole DNA was used to prepare the enzyme partial digest and to prepare the enzyme partial digest. There are now about 50,000 physical and qualitative changes.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Ono, Mitsui, Sato, Minamisawa: "Tow RpoH homologs responsible for the expression of heat shock protein genes in Sinorhizobium meliloti"Molecular & General Genetics. 246. 902-912 (2001)
Ono、Mitsui、Sato、Minamisawa:“Tow RpoH 同源物负责苜蓿中华根瘤菌中热休克蛋白基因的表达”分子
  • DOI:
  • 发表时间:
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
K.M., M.I., M.S., K.I., T.S., K.Y., H.M.: "Horizontal transfer of nodulation genes in soils and microcosms from Bradyrhizobium japonicum to B. elkanii"Microbes and Environments. 17(2). 82-90 (2002)
K.M.、M.I.、M.S.、K.I.、T.S.、K.Y.、H.M.:“土壤和微观世界中结瘤基因从日本慢生根瘤菌到艾氏芽孢杆菌的水平转移”微生物和环境。
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  • 发表时间:
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  • 通讯作者:
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    菅原 雅之;高橋 智子;梅原 洋佐;今道 仁;今野 勇希;佐藤 修正;三井 久幸;南澤 究
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