人工呼吸器損傷肺における肺微小循環中の白血球動態の生体顕微鏡的検討

呼吸机损伤肺微循环白细胞动态的活体显微镜研究

• 批准号: 13770304
• 负责人: 宮尾 直樹
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770304/
• 关键词: VILI; 接着分子; ICAM-1; VCAM-1; P-selectin; 共焦点顕微鏡

VILI(Ventilator-Induced Lung Injury人工呼吸器肺損傷)は近年人工呼吸器管理を行う際に重要な概念となっている。我々は8週齢雄性ラット(Sprague-Dawley rat)を使用し、high tidal(15ml/kg)とlow tidal(7.5ml/kg)で6時間換気後、生体顕微鏡および共焦点顕微鏡で肺微小循環中の血球動態を観察した。その結果、high tidal群では細動脈、細静脈および毛細血管中の白血球の赤血球に対する相対速度の低下とローリング白血球の増加を確認した。免疫組織染色による接着分子の発現の検討では、ICAM-1、VCAM-1、P-selectinの有意な発現増強も確認し、これらの白血球のローリングおよび相対速度の低下の原因であることを証明することができた。白血球を分離し肺微小循環動態を観察したところ、好中球がローリングに関与し、一方リンパ球はローリングに関与しないことが判明した。これらのローリング好中球と赤血球に対する好中球の相対速度は抗ICAM-1抗体、fucoidin(selectinのブロック)の投与により、ローリング好中球の出現頻度の低下、相対速度の回復を認めた。免疫組織染色では接着分子が細動静脈や毛細血管等どの血管に発現しているか確認困難なため、ICAM-1とVCAM-1をin vivo染色し共焦点レーザー顕微鏡を用い接着分子発現血管の同定を行った。その結果世界初のVILI肺の微小血管中の接着分子の染色に成功した。今後は抗VCAM-1抗体、抗P-selectin抗体によるブロック実験を予定している。VILI肺においてNFκBの活性が増強し、ステロイド投与により活性が抑制されるとの報告があり、ステロイド前投与により接着分子の発現の抑制とローリング白血球の出現頻度の低下が認められるかどうか検討する予定である。

VILI (Ventilator-Induced Lung Injury artificial respirator lung cancer) "artificial respirator management" in recent years has introduced the concept of "important", "lung cancer". After using Sprague-Dawley rat and high tidal (15ml/kg) low tidal (7.5ml/kg) for 6 hours, we examined the blood cell dynamics in the lung microcirculation by using the common focus micrometer. The results of the test, the results of the high tidal group, the number of white blood cells in the blood vessels, the red blood cells in the hair vessels, the red blood cells in the hair vessels, the low speed, the low speed, the white blood cells, the white blood cells. Immuno-tissue staining followed by molecular analysis showed that ICAM-1, VCAM-1, P-selectin were intentionally detected, white blood cells were detected, white blood cells were detected, the speed of phase was low, and the cause was clear. The white blood cells are separated from the lungs by microdynamic observation, so that the ball can be detected, and one side can be detected by the ball. Anti-ICAM-1 antibody, fucoidin (red blood cell), anti-ICAM-1 antibody, fucoidin (red blood cell, red blood cell, red Immuno-tissue staining was followed by molecular dynamic observation of hair vessels and other blood vessels to confirm that they were difficult to detect, and ICAM-1 VCAM-1 in vivo staining was used to detect confocal microscopes. The results showed that the molecular staining of VILI pulmonary microvessels was successful in the world. In the future, anti-VCAM-1 antibodies, anti-P-selectin antibodies, anti-P-selectin antibodies, anti-HIV antibodies, anti-P-selectin antibodies, anti-P-selectin antibodies and anti-P-selectin antibodies. The activity of NF κ B in the VILI lung was significantly higher than that in the control group (P < 0.05). The activity of Kappa B in the lungs was significantly higher than that in the control group (P < 0.01). The activity of kappa B in the lungs was significantly higher than that in the lungs.