経皮的遺伝子導入法の最適化とDNAワクチンへの応用

经皮基因转移方法的优化及其在DNA疫苗中的应用

• 批准号: 13770463
• 负责人: 長谷川 正規
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770463/
• 关键词: プラスミド; needle free jet injection; intradermal needle injection; DNAワクチン; 腫瘍免疫; 経皮的遺伝子導入

我々はルシフェラーゼ遺伝子(Luc)をコードしたプラスミドを用い,needle free jet injectionにてプラスミドを導入する実験を行ってきた.今回の我々の行った実験のデータではneedle free jet injectionによってマウス皮膚へ打ち込んだ際のルシフェラーゼ活性は,intradermal needle injectionによるマウス皮膚でのプラスミド投与の際のルシフェラーゼ活性とほぼ同等であった.経皮的遺伝子導入の最適化するためにintradermal needle injection, needle free jet injection,密封法(ODT)で最も最適な条件はintradermal needle injection, needle free jet injection,ではともに12時間後がルシフェラーゼ活性が最大で,密封法(ODT)ではほとんどルシフェラーゼ活性が認められなかった.プラスミドの量はintradermal needle injection, needle free jet injection,でともに一回に100μgが最大となった.GFPをコードしたプラスミドを用いて蛍光顕微鏡にて導入した結果,intradermal needle injectionでは表皮にび漫性に発現しており,needle free jet injectionでは表皮にfocusに強い発現を認めた.さらにAntibody assasyでもintradermal needle injection, needle free jet injectionともに同等の抗体の発現を認めた.今後特異的なCTL誘導を目指して研究を続けていきたい.

I'm a 々はルシフェラーゼ弝子(Luc)をコードしたプラスミドを用い,needle free jet injectionにてプラスミドを Import する実験を行ってきた.Now return to の我々の行った実験のデータではneedle free jet Injection of skin into the skin, intradermal needle injectionによるマウスcutaneous injection injection and injection active ingredientとほぼequivalent であった.経PI's remaining 伝子 imported のoptimization するためにintradermal needle injection, needle free jet injection, sealing method (ODT) is the most suitable condition and intradermal needle injection, needle free jet injection, maximum activity after 12 hours, sealing method (ODT)ではほとんどルシフェラーゼActivityがcognizeめられなかった.プラスミドのquantityはintradermal needle injection, needle free jet injection,でともにに100μgがMAXとなった.GFPをコードしたプラスミドをいて荍光桕Microscopeにてintroductionした results, intradermal needle injectionではepidermisにび性に発appearsしており,needle free jet injectionでは epidermisにfocusにstrongい発appearsをcognizeめた.さらにAntibody assasyでもintradermal needle injection, needle free jet The injection of the same antibody is now recognized. In the future, specific CTL induction will be studied.