放射線大量一括照射に伴う乏突起神経膠細胞のapoptosisに関する研究

高剂量放射线照射相关少突胶质细胞凋亡的研究

• 批准号: 13770760
• 负责人: 辛 正廣
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770760/
• 关键词: 放射線大量一括照射; p53; apoptosis; oligodendroglia; 大量一括照射; アポートシス

ラットの全脳に5Gy、10Gy、20Gyの一回大量照射をそれぞれ20体づつ行い、各線量を照射して1、4、8、24時間後にラットを5匹づつsacrificeして灌流固定した。DNA damageをTUNEL法を用いてin situに検出し結果、照射1時間後より、照射群ではコントロール群に比して有為なTUNEL標識率の上昇を認めることを確認した。TUNEL標識率は10Gy群では照射8時間後、20Gy群では照射4時間後に最大となったが、両群とも照射24時間後にはコントロールレベルに低下した。TUNEL positive cellは主に大脳、及び小脳の白質に分布し、形態学的にgliaと思われた。神経細胞、及び血管内皮細胞で標識されたものはなかった。Apoptosis rateは白質のうち特にCA1領域のcorpus callosum及びfimbriaで高く、corpus callosumのgenu及び小脳白質では低い傾向があった。GFAPとの二重免疫染色の結果、GFAPで標識されるTUNEL positive cellはなく、同法で標識されたgliaはoligodendrocyteである可能性が強く示唆された。しかしながら、CD57やAnti CNP等のoligodendrogliaの選択的指標となるマーカーについては、一部で標識率が上昇した部分も認めたが、あきらかなTUNEL positive cellとの相関は確認されなかった。次に、p53を検出する抗体(Novocastra CM5,polyclonal, NCL-p53-CM5p)を用いて、TUNEL positive cellの標識率が最大であった照射4時間後の20Gy群で、どのくらいの割合いでp53の発現が認められるかを二重免疫染色を行って確認した。しかしながら、この実験では、一次抗体と二次抗体の至適濃度の決定が困難であり、p53の発現状況の検討に著しい手間と時間を必要とした。結果として、apoptosis rateの高かったCA1領域のcorpus callosum及びfimbriaの白質で、p53の発現自体も認められていることが確認されたものの、これらとTUNEL positive cellと相関については、有意な相関が得られなかった。このため、p53 knock-out mouseを用いての放射線の大量一括照射後のoligodendrogliaにおけるapoptosisに関する検討は未だ結果が出ていない。

After 1, 4, 8 and 24 doses of 5Gy, 10Gy and 20Gy, each dose was irradiated in a large number of times. After 1, 4, 8 and 24 hours of irradiation, 5 dogs were subjected to sacrifice perfusion fixation. The DNA damage TUNEL method was used to verify the results of the results, after 1 hour of irradiation, and the radiation group was used to confirm that the rate of TUNEL was higher than that of the TUNEL. The TUNEL labeling rate was 8 hours after 10 Gy irradiation, 4 hours after 20 Gy irradiation, and 24 hours after cluster irradiation. The main body of the TUNEL positive cell is big, and the small and white are distributed, and the morphology is the glia of thought. Shenzhuo cells and vascular endothelial cells are known as "vascular endothelial cells". Apoptosis rate has a special field of CA1-corpus callosum and fimbria-high, corpus callosum-genu and low-profile. The result of GFAP double immunostaining, the result of GFAP label recognition, the possibility of glia label oligodendrocyte staining, and the possibility of double immunostaining in the same method strongly indicate the possibility of instigation. The fingers of the oligodendroglia options, such as CD57, TUNEL positive cell, and so on, confirm that they do not know what to do. Secondary and p53 positive Novocastra CM5,polyclonal (NCL-p53-CM5p) were irradiated with 20Gy and TUNEL positive cell labeling rate Maxima after 4 hours of irradiation, 20Gy population was detected by double immunostaining and double immunostaining was confirmed. Primary antibody, primary antibody and primary antibody. Results the results showed that there were significant differences in the field of CA1, corpus callosum, fimbria, p53 and so on. Results the results showed that there were significant differences in the field of CA1, fimbria, p53 and so on. After a large number of oligodendroglia radiation, p53 knock-out mouse and p53 DNA were irradiated in a large number of cases, the results showed that the symptoms were not confirmed by the results of apoptosis radiation tests.

项目成果

Masahiro Shin: "Analysis of treatment outcome after stereotactic radiosurgery for cavernous sinus meningiomas"Journal of Neurosurg. 95(3). 435-439 (2001)

Masahiro Shin：“海绵窦脑膜瘤立体定向放射外科治疗后的治疗结果分析”神经外科杂志。

Masahiro Shin: "Mini review : Gamma knife radiosurgery for pituitary adenoma"Biomed Pharamacother. 56. 178-181 (2002)

Masahiro Shin：“迷你评论：垂体腺瘤的伽玛刀放射外科手术”Biomed Pharamacother。

Masahiro Shin, Keisuke Ueki, Hiroki Kurita, Takaaki Kirino: "Malignant transformation of a vestibular schwannoma after gamma knife radiosurgery"Lancet. 360(9329). 309-310 (2002)

Masahiro Shin、Keisuke Ueki、Hiroki Kurita、Takaaki Kirino：“伽玛刀放射外科手术后前庭神经鞘瘤的恶性转化”《柳叶刀》。

Kurita H, Kawahara N, Asai A, Ueki K, Shin M, Kirino T.: "Radiation-induced apoptosis of oligodendrocytes in the adult rat brain"Neurological Reseach. 23(8). 869-874 (2001)

Kurita H、Kawahara N、Asai A、Ueki K、Shin M、Kirino T.：“辐射诱导的成年大鼠脑中少突胶质细胞凋亡”神经学研究。

Masahiro Shin: "Retrospective Analysis on 10-year Experience of Stereotactic Radiosurgery for Artenovenous Malformations in Children and Adolescents"Journal of Neurosurg. (in press). (2001)

Masahiro Shin：“立体定向放射外科治疗儿童和青少年动静脉畸形10年经验回顾分析”神经外科杂志。