細胞表面ペプチド分解酵素の卵巣機能調節における生理的意義の研究

细胞表面肽降解酶调节卵巢功能的生理意义研究

• 批准号: 13770912
• 负责人: 塚原 慎一郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770912/
• 关键词: 卵巣機能; P-LAP; AP-A; 黄体化顆粒膜細胞; アミノペプチダーゼ

1 体外受精胚移植時に得られた黄体化顆粒膜細胞からRNAを抽出してRT-PCRを行い、Placental leucine aminopeptidase(P-LAP)/OTase及びAminopeptidase A(AP-A)mRNAの発現を検討した。その結果、黄体化顆粒膜細胞においてP-LAP及びAP-A mRNAの発現を認めた。2 体外受精胚移植時に得られた黄体化顆粒膜細胞を初代培養し、培養細胞から蛋白を抽出してwestern blottingを行い、P-LAP蛋白の発現を検討した。その結果、培養黄体化顆粒膜細胞においてOTaseと考えられる分子量(MW=180kDa)の蛋白の発現を認めた。3 手術により得られた月経各周期の卵巣組織にて免疫組織染色を行い、P-LAP蛋白の局在を検討した。発育卵胞、成熟卵胞壁の顆粒膜細胞、及び月経黄体にP-LAP蛋白の局在を認め、月経黄体では特に強く染色された。しかしながら、原始卵胞や閉鎖卵胞壁の顆粒膜細胞、白体にはその局在を認めなかった。4 3と同様の組織にてin situ hybridizationを行い、P-LAP mRNAの局在を検討した。その結果、P-LAP mRNAの局在も、蛋白と同様であり、卵巣にてP-LAPを産生して、その生理活性を発揮していることが裏付けられた。以上の結果、P-LAP蛋白及びmRNAが、卵巣で発現していることが初めて明らかとなった。その局在は月経周期に応じて変化していることから、P-LAPが卵巣の機能調節、特に黄体の機能調節に重要な役割を果たしていることが示唆された。今後卵巣の性ステロイド産生の調節との関連、またAP-Aについても研究を進める予定である。

The main results were as follows: (1) during in vitro fertilization and embryo transfer, luteinized granule membrane cells, RNA extraction RT-PCR, Placental leucine aminopeptidase (P-LAP)

项目成果

Shigeru Toda: "Existense of Placental Leucine Aminopeptidase (P-LAP) / Oxytocinase / Insulin-Regulated Membrane Aminopeptidase (IRAP) in Human Endometrial Epitherial Cells"J Clin Endocrinol Metab. (submitted).

Shigeru Toda：“人子宫内膜上皮细胞中胎盘亮氨酸氨基肽酶（P-LAP）/催产素酶/胰岛素调节膜氨基肽酶（IRAP）的存在”J Clin Endocrinol Metab。