肝腫瘍に対するラジオ波凝固療法の基礎的研究

肝脏肿瘤射频凝固治疗的基础研究

• 批准号: 14770437
• 负责人: 松橋 俊夫
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770437/
• 关键词: ラジオ波凝固療法(RFA); アポトーシス; 肝腫瘍; ラジオ波凝固療法(RFA.)

<研究結果>H-E染色上、ラジオ波凝固療法(以下:RFA)後の焼灼部は層構造を呈し、この層構造は直後から3日目までの間に3層から5層に変化していた。焼灼部辺縁では細胞萎縮、核の縮小化と核クロマチン濃縮などの形態変化が経時的に進行し、24時間以後の標本では周囲正常部と明瞭に区別されるようになった。定量評価ではRFA直後と2時間後、2時間後と24時間後の肝細胞密度増加、核縮小化が統計的に有意であった(P<0.01,Mann-Whitney U-test:細胞密度,Student's t-test:核サイズ)。核濃度は直後と比較して24時間後に統計学的有意な上昇を示した(p<0.01,Student's t-test)。TUNEL染色ではRFA直後には陽性細胞が認められず、2時間後の標本では、中心部に相当するH-E染色上の第1層、第2層の一部で陽性を示した。24時間以後の標本では辺縁部に相当する第3層、第4層までTUNEL陽性域が拡大した。辺縁部のTUNEL陽性率は経時的に上昇し(P<0.01,analysis of variance:ANOVA)、7日目には全ての細胞が陽性を示した。HIF-α染色では、FEA直後からH-E染色上の形態変化の見られる領域に一致して陽性を示していた。特に辺縁部第3層、第4層では陽性率が極めて高く、持続的な強い虚血状態にあることが判明した。生化学的検討では、辺縁部組織のDNA電気泳動で24時間後に初めて明瞭なDNA ladder formationが検出された。Caspase-3活性はRFA直後、2時間後では低値を示し、24時間後、3日後で著明な上昇を示していた。<結論>RFA後の焼灼部辺縁は、形態学的にも生化学的にもアポトーシスの条件を満たしていた。辺縁部におけるアポトーシス誘導と経時的形態変化観察の結果を総合的に判断すると、病理学的な治療効果範囲判定は24時間以後に行うのが確実な手法と考えられた。その際の判定には、煩雑な生化学的手法を用いなくともH-E染色のみで十分判定可能である。ただし、TUNEL染色を併用すれば一層精度の高い治療効果範囲判定が可能である。

<Results> After H-E staining, the layer structure of cautery area was changed from three layers to five layers after RFA. The cautery part is characterized by cell atrophy, nuclear shrinkage, nuclear condensation, morphological change, and normal part after 24 hours. Quantitative evaluation showed that the increase of hepatocyte density and nuclear shrinkage were statistically significant (P<0.01,Mann-Whitney U-test: cell density,Student's t-test: nuclear shrinkage). A statistically significant increase in nuclear concentrations was observed after 24 hours (p<0.01,Student's t-test). TUNEL staining showed positive cells in the first and second layers after RFA, and positive cells in the second and third layers after RFA. After 24 hours, the TUNEL positive domain is larger than the third and fourth layers. The TUNEL positive rate in the peripheral blood increased significantly (P<0.01,analysis of variance:ANOVA), and the TUNEL positive rate in the peripheral blood increased significantly (P <0.01,analysis of variance: ANOVA). HIF-α staining, FEA staining, H-E staining, morphological changes, and consistent areas of positive staining In particular, the third and fourth layers of the upper part of the body are extremely high, and the upper part of the body is weak. The biochemical analysis revealed DNA ladder formation after 24 hours of DNA electromigration in the tissue. Caspase-3 activity decreased after RFA, decreased after 2 hours, increased after 24 hours, and increased after 3 days. <Conclusion> The condition of cautery, morphology and biochemistry after RFA The results of morphological changes in the induction of the disease were determined by combining the results of pathological changes with the results of treatment after 24 hours. It is possible to determine whether the method of biochemistry is suitable for H-E staining. The combination of TUNEL staining and the detection of the therapeutic effect is possible with a high level of accuracy