ラット保存肝の肝小葉Zone別尿素サイクル酵素局在からみた肝臓過冷却保存の有用性

从保存的大鼠肝脏中肝小叶区尿素循环酶定位的角度来看肝脏过冷保存的效用

• 批准号: 14770633
• 负责人: 浅桐 公男
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770633/
• 关键词: 過冷却保存; 保存障害; 再灌流障害; 肝移植

0℃以下での未凍結温度である過冷却保存を肝臓において確立させるために、過冷却保存の有用性をラット肝においてグリソンから中心静脈までをzone1〜3に分類し検討した。対象と方法:摘出保存肝の障害程度を4℃と-0.5℃過冷却保存で比較検討する。SD系Lewis雄性ラットを用い、摘出肝を4℃のUW液にし4℃保存群を作成し、過冷却保存群はプログラム冷却装置で90分掛けて-0.5℃に冷却した。保存時間は12時間と24時間。検討項目として1.保存肝中のATP量を測定(各 n=7)。2.保存障害の検討として肝類洞径及び類洞壁細胞核の濃染化を検討(各 n=7)。3.再灌流障害の検討として保存24時間の再灌流時にDichlorofluorescin Diacetate(DCFH)とPropidium Iodide(PI)を用い、活性酸素発生量と死細胞数をzoneごとに検討(各 n=5)。また抗グルタミンシンテターゼ抗体にて染色した後に、尿素サイクル機能評価を行いアンモニア代謝能力の検討を行なった。結果:1.ATP量は-0.5℃保存群が4℃保存群に比較して保存12時間時に有意に高値を認めた。2.肝類洞径は組織障害の進行に伴い狭小化を認めるが、4℃保存群は全てのzoneにおいて-0.5℃保存群に比較して有意な狭小化を認めた。また類洞壁細胞核の濃染化も4℃保存群で全zoneにおいて-0.5℃保存群に比較して有意に認めた。3.DCFHの輝度は全Zoneにおいて4℃群が-0.5℃群と比較して有意に上昇し、Zone2が他のZoneと比較して有意に高値を認めた。PIの発光個数は全Zoneにおいて4℃群が-0.5℃群と比較して有意に増加していた。アンモニア代謝能力の検討では有意な差は認められなかった。結語:ラット肝臓単純浸漬保存において、-0.5℃過冷却保存が4℃保存に比較して、保存障害と再灌流障害ともに軽減されることが示唆された。

Unfrozen temperature below 0℃, subcooled preservation, establishment, usefulness, subcooled preservation, classification, zone1 ~ 3 Methods: To compare the damage degree of liver preserved at 4℃ and-0.5℃. SD system Lewis liver extract was prepared in UW solution at 4℃ and cooled at-0.5℃. The storage time is 12 hours and 24 hours. 1. Determination of ATP content in preserved liver (n=7). 2. The preservation damage was investigated by the density-staining method of liver cavity diameter and cavity wall nuclei (n=7 each). 3. The effects of Dchlorofluorescin Diacetate(DCFH) and Propidium Iodide(PI) on reperfusion injury were investigated. Anti-tumor antibody staining, functional evaluation of urea and metabolic capacity evaluation Results: 1. ATP content was significantly higher when stored at-0.5℃ than at 4℃ for 12 days. 2. The liver cavity diameter was narrowed in the process of tissue damage. The 4℃ preservation group was narrowed in the whole zone. The-0.5℃ preservation group was narrowed intentionally. The cell nuclei of wall-like cells were concentrated and stored at 4℃, and the whole zone was compared with those stored at-0.5℃. 3. The brightness of DCFH is higher than that of the whole Zone 4℃ group and higher than that of the whole Zone2 group. The number of PI light emitted from the whole Zone is 4℃,-0.5℃ and the comparison is intentionally increased. The study of metabolic capacity is intended to improve the quality of metabolism. Conclusion: Liver preservation by pure immersion, supercooling at-0.5℃, preservation at 4℃, preservation barriers, reperfusion barriers, and reduction.

项目成果

ラット肝臓を用いた未凍結過冷却保存の有用性の検討

使用大鼠肝脏检查未冷冻过冷保存的有效性

• 发表时间: 2004
• 期刊: 久留米医学会雑誌 67・1
• 作者: 浅桐公男