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内耳遺伝子治療における免疫応答について

关于内耳基因治疗中的免疫反应

基本信息

批准号：
14770885
负责人：
石本晋一
金额：
$ 2.5万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

Adenovirus(GFP)10^<11>を含んだ5μlをモルモットの蝸牛鼓室階に投与してgene expressionがおこっている期間をしらべたところcontrol群(PBS皮下投与群)と比較して免疫抑制状態(サイクロフォスファマイド皮下投与群: CFM群)で有意に延長していることが観察できた。Adenovirus投与後3週間後に内、外有毛細胞の数をcountしたところcontrol群、CFM投与群での細胞障害はほとんど観察できなかった。これは鼓室階にvirusを投与しても中央階では細胞障害生じないことを示している。いままでの報告から鼓室階に神経栄養因子などの遺伝子を導入したAdenovirusを投与しても初回投与に於は免疫応答による細胞障害が生じないことを示したものと思われる。また3週間間隔をあけて2回目のAdenovirusを投与した場合の内、外有毛細胞の数をcountしたところcontrol群ではCFM投与群と比較して有意に細胞障害が生じていた。特に外有毛細胞の障害は顕著で有意差を認めた。また鼓室階にPBSを2回投与した場合、細胞障害はほとんど生じなかった。これはAdenovirusに対してT cellを中心とした免疫応答が起こって細胞障害が生じたものと推測される。現在組織切片を作成して抗T cell抗体にて染色しているところである。蝸牛の中央階に直接投与した場合も検討した。その結果は1回の投与によりcontrol群、CFM群でコルチ器の有毛細胞の障害、特に外有毛細胞の障害を顕著に認めることができた。これはおそらく投与法による機械的な障害生じたものと推測される。この投与法はコルチの支持細胞に遺伝子導入を可能にする投与法であるため更なる検索が必要であると考アポトーシスによる細胞死がどのように起こるのか検討する必要があると考えている。

Adenovirus(GFP)10 μ <11>g contains 5μl of the gene expression in the tympanic cavity of snails. The control group (PBS subcutaneous injection group) and the immunosuppressive state (CFM group) are intentionally prolonged. 3 weeks after Adenovirus administration, the number of inner and outer hairy cells was counted, and the number of cell damage was observed in control group and CFM group. The virus was injected into the tympanum and the cells in the central part of the cell were damaged. In the middle of the report, the Adenovirus was introduced into the brain and the immune response was detected. The number of inner and outer hairy cells in the case of Adenovirus infection at 3 weeks interval is counted and compared with that of CFM infection. In particular, there are hairy cells that are harmful to the brain. In case of cell damage, PBS is used for 2 times. This is the first time that an Adenovirus has been detected. Tissue sections are now prepared for staining with anti-T cell antibodies. The snail's central step is directly projected on the occasion. The results are as follows: 1. The control group, CFM group, hairy cells of the organ, and special hairy cells are damaged. This is the first time I've ever seen a woman. The method of gene transfer in the supporting cells of the cell is possible. The method of gene transfer is necessary. The method of gene transfer is necessary.