頭頸部癌における腫瘍エスケープ機構の解明

前年度の研究で、大腸癌、肺癌にてみられる宿主に対するエスケープ機構が頑頸部癌においても存在することがわかった。さらにApoptosisを来す経路においてExtrinsic pathwayよりもIntrinsic pathwayが主経路であり、これを抑制することがApoptosisからのより効率的な回避につながることが示唆された。近年海外でもその主たる蛋白であるIAP(Inhibitor of apoptosis protein)ファミリーに関する論文もみられ、その中でも特にSurvivinにおけるものは多数報告されている。これは正常な成人の組織では発現せず、さらに種種の癌細胞において非常に強く発現するIAPで、我々が行った実験でも、癌組織の90%以上が発現しており、この発現を抑制することがもっとも癌細胞のApoptosisを誘導するものと考えた。そこで今回は7種類のヒト由来の頭頸部癌細胞株7種類を用いて実験を行った。細胞を培養し、これらよりmRNAを抽出。さらにRT-PCR法にてSequence detection systemを用い、Survivinの発現をみた。その結果全ての細胞株でSurvivinの発現を認めた。さらにこれらのプレートを電気泳動に流したところ、すべての細胞株にバンドの形成がみられた。そこでSurvivinを発現している細胞株に対し、SurvivinをコードするmRNAに対するAntisenseを結合させたところ、明らかに細胞が、Apoptosisに陥っていることがわかった。今後はAntisense treatmentに抗癌剤投与あるいは放射線照射をあわせで行い、さらにApoptosisが誘導されるかどうかにつき検討したい。

前年度の研究で、大腸癌、肺癌にてみられる宿主に対するエスケープ機構が頑頸部癌においても存在することがわかった。さらにApoptosisを来す経路においてExtrinsic pathwayよりもIntrinsic pathwayが主経路であり、これを抑制することがApoptosisからのより効率的な回避につながることが示唆された。近年海外でもその主たる蛋白であるIAP(Inhibitor of apoptosis protein)ファミリーに関する論文もみられ、その中でも特にSurvivinにおけるものは多数報告されている。これは正常な成人の組織では発現せず、さらに種種の癌細胞において非常に強く発現するIAPで、我々が行った実験でも、癌組織の90%以上が発現しており、この発現を抑制することがもっとも癌細胞のApoptosisを誘導するものと考えた。そこで今回は7種類のヒト由来の頭頸部癌細胞株7種類を用いて実験を行った。細胞を培養し、これらよりmRNAを抽出。さらにRT-PCR法にてSequence detection systemを用い、Survivinの発現をみた。その結果全ての細胞株でSurvivinの発現を認めた。さらにこれらのプレートを電気泳動に流したところ、すべての細胞株にバンドの形成がみられた。そこでSurvivinを発現している細胞株に対し、SurvivinをコードするmRNAに対するAntisenseを結合させたところ、明らかに細胞が、Apoptosisに陥っていることがわかった。今後はAntisense treatmentに抗癌剤投与あるいは放射線照射をあわせで行い、さらにApoptosisが誘導されるかどうかにつき検討したい。