ホメオボックス遺伝子Crxの導入による網膜神経前駆細胞の分化誘導と移植
导入同源盒基因Crx诱导视网膜神经祖细胞分化和移植
基本信息
- 批准号:14770982
- 负责人:
- 金额:$ 2.5万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2003
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
網膜神経幹細胞をより効率良く網膜視細胞に分化誘導するために、Crxと同様に視細胞の運命決定に関与している可能性があるホメオボックス遺伝子Otx2について、引き続き機能解析を行った。発生期のOtx2の視細胞における発現パターンを解析したところ、Otx2の発現はCrxにやや先行し、神経網膜においてはほぼ重複していることが示された。Otx2のホモ接合ノックアウトマウスは胎生致死のため、Crxプロモーターの制御下にOtx2の発現を消失させるようなコンディショナルノックアウトマウスを作成した。このコンディショナルノックアウトマウスは、生存および繁殖可能であった。網膜における表現形を解析したところ、生後9日においても視細胞の発生はみられず、アマクリン細胞の増加がみられた。この結果から、Otx2は網膜前駆細胞が視細胞に分化する際に必須であることが示された。続いて、レトロウイルスベクターを用いてOtx2を生後0日の網膜にトランスフェクションし、強制発現実験を行った。細胞系譜解析の結果、ウィルスベクターが感染した細胞のほとんどは視細胞に分化していることが示された。また、Crxプロモーターを用いたルシフェラーゼアッセイにより、Otx2がCrxプロモーター上のCRX結合部位を介してCrxの発現を制御することを示唆する結果が得られた。これらの結果より、Otx2は視細胞の初期発生において必要かつ十分であり、Crxの上流遺伝子として機能していると考えられた。Otx2を網膜神経幹細胞に導入することにより、視細胞への分化を効率よく誘導できる可能性があると考えられる。
Retinal god 経 stem cells を よ り sharper rate good く に retinal visual cell differentiation induced す る た め に, contents と with others に visual cell の destiny decided に masato and し て い る possibility が あ る ホ メ オ ボ ッ ク ス heritage 伝 son Otx2 に つ い て and き 続 き line function analytical を っ た. 発 stage の Otx2 の visual cell に お け る 発 now パ タ ー ン を parsing し た と こ ろ, Otx2 の 発 now は contents に や や first し, god 経 retinal に お い て は ほ ぼ repeat し て い る こ と が shown さ れ た. Otx2 の ホ モ joint ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス は viviparous death の た め, contents プ ロ モ ー タ ー の under the system of imperial に Otx2 の 発 を disappear now さ せ る よ う な コ ン デ ィ シ ョ ナ ル ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を made し た. Youdaoplaceholder5 コ コ ディショナ ディショナ ノッ ノッ アウト アウト ウス ウス であった, survival および reproduction possible であった. Retinal に お け る performance form analytical し を た と こ ろ, after 9 に お い て も visual cell の 発 raw は み ら れ ず, ア マ ク リ ン cells の raised plus が み ら れ た. こ の results か ら, Otx2 は 駆 before retinal cells が visual cells に す る interstate に must で あ る こ と が shown さ れ た. 続 い て, レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を with い て Otx2 を 0 days after born の retinal に ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し, forced 発 now be 験 を line っ た. Cell pedigree analytical の results, ウ ィ ル ス ベ ク タ ー が infection し た cells の ほ と ん ど は visual cells に し て い る こ と が shown さ れ た. ま た, contents プ ロ モ ー タ ー を with い た ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ に よ り, Otx2 が contents プ ロ モ ー タ ー の on contents combining site を interface し て contents の 発 now を suppression す る こ と を in stopping す る results ら が れ た. こ れ ら の results よ り, Otx2 は born early visual cells の 発 に お い て necessary か つ very で あ り, contents の high heritage 伝 son と し て function し て い る と exam え ら れ た. Otx2 god 経 を retinal stem cells に import す る こ と に よ り, depending on the cell へ の differentiation を sharper rate よ く induced で き る possibility が あ る と exam え ら れ る.
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Nishida, A: "Otx2 homeobox gene controls retinal photoreceptor cell fate and pineal gland development"Nat Neurosci. 6・12. 1255-1263 (2003)
Nishida, A:“Otx2 同源框基因控制视网膜感光细胞命运和松果体发育”Nat Neurosci 6·12 1255-1263 (2003)。
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- 影响因子:0
- 作者:
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Akagi, T: "Different characteristics of rat retinal progenitor cells from different culture periods"Neurosci Lett. 341・3. 213-216 (2003)
Akagi, T:“不同培养时期的大鼠视网膜祖细胞的不同特征”Neurosci Lett 341・3(2003)。
- DOI:
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Akita, J: "Neuronal differentiation of adult rat hippocampus-derived neural stem cells transplanted into embryonic rat explanted retinas with retinoic acid pretreatment"Brain Res.. 954・2. 8 (2002)
Akita, J:“用视黄酸预处理将成年大鼠海马来源的神经干细胞移植到胚胎大鼠移植视网膜中的神经分化”Brain Res.. 954・2.8 (2002)
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- 作者:
- 通讯作者:
雨宮かおり: "若年の網膜色素変性患者に併発した黄斑円孔"日眼会誌. 106・7. 7 (2002)
Kaori Amemiya:“患有色素性视网膜炎的年轻患者出现黄斑裂孔”,日本眼科协会杂志 106,7 月 7 日(2002 年)。
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