末梢組織炎症による歯痛伝達への修飾作用とセロトニン受容体の関与

周围组织炎症对牙痛传播和血清素受体参与的改变作用

• 批准号: 14771030
• 负责人: 谷本 武
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14771030/
• 关键词: 歯痛; 末梢皮膚炎症; 5-HT_3受容体; C_1ニューロン; 免疫組織化学; 下行性疼痛抑制系; carrageenan; receptor up-regulation; セロトニン受容体; イオントフォレーシス; カラゲニン; diffuse noxious inhibitory controls(DNIC)

末梢組織の炎症による歯痛伝達への修飾作用に対するセロトニン受容体の役割を明らかとするために,手掌皮膚へカラゲニン投与により急性炎症を誘発させ,免疫抗体染色法を用いて,カラゲニン投与による第一頸髄角(C_1)領域で5-HT_3受容体の数的変化がタンパクレベルで起きているか否かを検討した。Witar系雄性ラット(300-320g,6匹)を麻酔後,前肢足底へ0.9%-NaCl(対照群)と起炎物質カラゲニン(6mg/0.15cc,実験群)をそれぞれ皮下投与した。カラゲニン投与による炎症の指標は,薬物皮下投与前後の前足掌の厚さを計測することで炎症性浮腫の形成を定量化した。24時間後,動物を深麻酔し,ホルマリン灌流固定後にC_1領域を取り出し,前額断厚さ40μmの凍結切片を作成した。続いて,両群において5-HT_3受容体抗体に反応させ,ABC法処置後,DAB染色により受容体の発現(陽性細胞)を判定し,定量化・2群間において比較解析した。その結果,実験群のC_1領域炎症側の5-HT_3受容体陽性細胞は,対照群と比較して有意に増加しており(対照群65.7±6.5v.s.実験群99.2±7.6 cells/section, p<0.01,n=18,増加率51.0%),C_1領域の浅層(I-II層)において特に強い増加が観察された(増加率I-II層53.5%,III-V層34.6%)。C_1領域非炎症側においては,対照群と実験群との間で有意な変化は観察されなかった。以上の結果より,前肢皮膚へのカラゲニン投与24時間後の炎症は,C_1ニューロンにおける5-HT_3受容体のタンパクレベルでのup-regulationを誘引することが判明した。すなわち,遠隔皮膚の炎症により,5HT_3受容体を介するセロトニン作動性下行性疼痛抑制系が賦活化され,その結果,歯痛伝達が抑制される可能性が示唆された。

The inflammation of peripheral tissues is related to the modification of the receptor's activity, and the palm skin is affected by the acute inflammation. Immunoantibody staining method is used to investigate the change of the receptor's number in the first cervical angle (C_1) field. Witar is a male hormone (300-320g,6 horses) that is administered subcutaneously to the soles of forelimbs with 0.9%-NaCl(control group) and inflammatory substances (6mg/0.15cc, control group). Inflammatory markers such as the thickness of the forefoot before and after subcutaneous administration of the drug quantified the formation of inflammatory edema. After 24 hours, the animals were anesthetized deeply, and the C_1 domain was taken out after perfusion fixation. Frozen sections with a thickness of 40μm were made. After treatment with ABC method, the presence of 5-HT_3 receptor antibody was determined and quantified by DAB staining. 5-HT3 receptor-positive cells in inflammatory side of C_1 domain were significantly increased compared with control group (65.7±6.5v.s. control group 99.2±7.6 cells/section, p<0.01, n =18, increase rate 51.0%), and those in shallow layer of C_1 domain (layer I-II) were significantly increased compared with control group (increase rate 53.5% in layer I-II, 34.6% in layer III-V). C_1 domain non-inflammatory side of the medium, contrast group and group between the intentional change of the medium. The above results showed that the up-regulation of C_1-HT_3 receptor induced by C_1-HT_3 receptor was significantly different from that of C_1-HT_3 receptor induced by C_1-HT_3 receptor. The mechanism of active descending pain inhibition mediated by 5HT_3 receptor is activated, and the possibility of pain inhibition is suggested.