慢性C型肝炎における細胞障害性T細胞誘導不全機序の解析

慢性丙型肝炎细胞毒性T细胞诱导缺陷的机制分析

基本信息

  • 批准号:
    14770244
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.73万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 2003
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

§CHC症例のCD8細胞におけるHCV感染動態と細胞周期制御分子の発現1、CD8細胞におけるHCV感染動態CHCの末梢血CD8細胞よりRNAを抽出、HCVプラス鎖、マイナス鎖特異的プライマーを用いたPCRによりHCV感染動態を解析したところ、80%の症例でHCVの存在を認めた。2、HCV陽性CD8細胞の細胞周期動態HCV陽性CD8細胞をHCVペプチドパルスDCで刺激し細胞周期動態をDNA結合蛍光色素を用いFACSによるプロイデイパターン解析により評価したところ多くがS期にあった。3、HCV陽性CD8陽性T細胞における細胞周期制御分子の発現HCV陽性CD8細胞かちRNAを抽出、サイクリンD1-3、CDK4/6、サイクリンE、CDK2、サイクリンAの正の制御因子、CDK4インヒビターのP15、16、18、19、Cip/Kipインヒビターファミリーのp21、p27、p57の遺伝子発現動態を検討したところ、CDK2、サイクリンAの発現が見られたが、HCV陰性CD8細胞でも同様の発現がみられた。4、HCV遺伝子導入T細胞における細胞周期制御分子の発現樹立化ヒトCD8細胞株にHCVコア、NS5AタンパクcDNAを組込んだpcEF39neo プラスミドを用いHCVコア、NS5Aタンパク遺伝子を導入、HCVペプチドパルスDCで刺激した際の細胞周期制御分子の遺伝子発現量を測定したが、細胞周期制御分子の遺伝子発現量はコントロールプラスミドを導入したクローンと比較して変化が見られなかった。以上より、CHCのCD8陽性細胞にはHCV感染が認められるものの、その細胞周期制御分子の発現は非感染細胞と差異がなく、CTL誘導不全の原因とは考えにくいと思われた。なお本研究に用いた検体採取に際しては、患者に説明し本人の承諾を得て実施した。
Cases § CHC の CD8 cells に お け dynamic と る HCV infection cell cycle system of royal molecular の 発 now 1, CD8 cells に お け る HCV infection dynamic CHC の peripheral blood CD8 cells よ を り RNA extraction, HCV プ ラ ス lock, マ イ ナ ス lock specific プ ラ イ マ ー を with い た PCR に よ り HCV infection dynamic を し た と こ ろ 80% of cases of でHCV are present with を identification めた. 2, HCV positive の CD8 cells cycle dynamic HCV positive CD8 cells を HCV ペ プ チ ド パ ル ス DC で stimulus し cell cycle dynamic を dna-binding 蛍 photopigment を with い both FACS に よ る プ ロ イ デ イ パ タ ー ン parsing に よ り review 価 し た と こ ろ more く が S period に あ っ た. 3, A positive HCV positive CD8 T cells に お け る cell cycle system of imperial molecular の 発 now HCV positive CD8 cells か を ち RNA extraction, サ イ ク リ ン D1-3, CDK4/6, サ イ ク リ ン E, CDK2, サ イ ク リ ン A の is の suppression factor, CDK4 イ ン ヒ ビ タ ー の P15, 16, 18, 19, Cip / Kip イ ン ヒ ビ タ ー フ ァ ミ リ ー の p21 and p27, p57 の heritage 伝 発 dynamic を now son beg し 検 た と こ ろ, CDK2, サ イ ク リ ン A の 発 が now see ら れ た が, HCV negative CD8 cells で も with others の 発 now が み ら れ た. 4, HCV but 伝 import t-cell に お け る cell cycle system of imperial molecular の 発 now set the ヒ ト CD8 cell lines に HCV コ ア, NS5A タ ン パ ク cDNA を group 込 ん だ pcEF39neo プ ラ ス ミ ド を with い HCV コ ア, NS5A タ ン パ ク heritage 伝 を import, HCV ペ プ チ ド パ ル ス DC で stimulus し た interstate の cell cycle system of imperial molecular の heritage 伝 son を 発 now quantity determination し た が, cell cycle system of royal molecular の heritage 伝 son 発 now quantity は コ ン ト ロ ー ル プ ラ ス ミ ド を import し た ク ロ ー ン と compare し て variations change が see ら れ な か っ Youdaoplaceholder0. Above よ り, CHC の CD8 positive cells に は HCV infection が recognize め ら れ る も の の, そ の cell cycle system of imperial molecular の 発 は now not infected cells と differences が な く, incomplete CTL induced の reason と は exam え に く い と think わ れ た. な お に this study use い た 検 body take に interstate し て は, patients に し him の commitment を て are be applied し た.

项目成果

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