心筋炎惹起T細胞株への治療遺伝子導入による新しい心臓病治療

通过将治疗基因引入心肌炎诱导 T 细胞系来治疗新的心脏病

• 批准号: 14770329
• 负责人: 猪又 孝元
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770329/
• 关键词: 心筋炎; 遺伝子治療

1)これまでに確立した心筋炎惹起性T細胞株はCM2ペプチドの抗原刺激で得られたbulk cultufe株のみである。そこで、目的遺伝子担体としての細胞株の均一化、すなわちクローン化を目指す必要が生じていた。そこで、まず段階希釈法に基づく細胞株のクローン化を試みた。しかしながら、繰り返しの抗原刺激を必要とする一方で、細胞株は容易に心筋炎発症能を低下させることが判明したため、同法によるクローン化を断念した。2)マウスIL-10遺伝子のGFP発現レトロウイルスベクター(pLEGFP-N1,CLONTECH)に導入に成功した。このベクターはNIH3T3などの接着細胞には容易にトランスフェクトし、目的蛋白を発現することは確認できた。しかし最終目的であるCM2特異的心筋炎惹起T細胞株へのトランスフェクトはきわめて困難であり、(1)低速遠心、(2)共培養、(3)ウイルス産性の純化、を通じて遺伝子導入を繰り返し試みたが、今のところ成功裏には至っていない。今後は、ベクターの変更を視野に入れて検討を行う予定である。3)リンパ球などの浮遊細胞への遺伝子導入の不確実性に鑑み、樹状細胞へのトランスフェクトを計画した。すなわち、脾臓浮遊細胞から樹状細胞を抽出し、上記法に基づいての遺伝子導入を現在試みている。

1) こ れ ま で に establish し た heart muscle inflammation provoked sexual T cell lines は CM2 ペ プ チ ド の antigen stimulation で have ら れ た bulk cultufe strains の み で あ る. そ こ で, purpose but 伝 supporter と し て の cell lines of homogenization, す の な わ ち ク ロ ー ン change を refers す が necessary raw じ て い た. Youdaoplaceholder0 で で, まず the に base づく cell line of the shishafafa <s:1>, ロ ロ, <s:1>, を, を, を test みた. し か し な が ら, Qiao り return し の antigen stimulation を necessary と す で る party, easy cell lines は に can disease of heart muscle inflammation 発 を low さ せ る こ と が.at し た た め, with the method of に よ る ク ロ ー ン change を desist し た. 2) マ ウ ス IL - 10 heritage 伝 son の GFP 発 now レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー (pLEGFP - N1, CLONTECH) に import に successful し た. こ の ベ ク タ ー は NIH3T3 な ど の then cells に は easy に ト ラ ン ス フ ェ ク ト し, target protein を 発 now す る こ と は confirm で き た. Ultimately し か し で あ る CM2 specific heart muscle inflammation provoked T cell lines へ の ト ラ ン ス フ ェ ク ト は き わ め て difficult で あ り, (1) low speed far heart, (2) the total training, (3) ウ イ ル ス sex の purification, を tong じ て heritage 伝 son import を Qiao り return し try み た が, today の と こ ろ success に は to っ て い な い. In the future, ベ, ベ, タ, タ will change the を field of vision, に entry into れて検, を field う is determined to be である. 3) リ ン パ ball な ど の phytoplankton cells へ の posthumous son 伝 import の uncertain be に jian み, dendritic cells へ の ト ラ ン ス フ ェ ク ト を project し た. す な わ ち, splenic phytoplankton cells か ら dendritic cells を spare し, written law に づ い て の posthumous son 伝 import を now try み て い る.

项目成果

Nishii M, Inomata T, Takehana H, et al.: "Serum levels of interleukin-10 on admission as a Prognostic predictor of human fulminant myocarditis."J Am Coll Cardiol. (in press). (2004)

Nishii M、Inomata T、Takehana H 等人：“入院时血清白细胞介素 10 水平可作为人类暴发性心肌炎的预后预测因子。”J Am Coll Cardiol。