Cdc7キナーゼの減数分裂過程における機能の解析

Cdc7激酶在减数分裂过程中的功能分析

• 批准号: 14780535
• 负责人: 荻野 桂子
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780535/
• 关键词: 分裂酵母; Cdc7キナーゼ; 減数分裂前DNA複製; 減数分裂期組み換え; クロマチンリモデリング; DNA二重鎖切断(DSB); チェックポイント; 第一および第二減数分裂; 減数分裂; pat1変異体; 胞子形成

出芽酵母Cdc7キナーゼのホモログである分裂酵母Hsk1タンパク質は、体細胞増殖においてS期の開始と進行に必須なタンパク質であり、そのキナーゼ活性は制御サブユニットであるDfp1/Him1タンパク質により制御されている。hsk1温度感受性変異株(hsk1-89)二倍体株を窒素源飢餓により減数分裂過程へ誘導したところ、一核のままで停止していた。さらに詳細な解析を行うためpat1(ts)の株において温度シフトにより誘導される減数分裂過程を、hsk1-89変異株で検討したところ、野生型に比べて、減数分裂前DNA複製の開始と進行に遅れが生じ、一核のまま停止していた。また、減数分裂期組み換えに先立って形成されるDNA二重鎖切断(DSB)が観察されなかった。組み換えhotspotであるade6-M26部位におけるDNA二重鎖切断も観察されなかった。DSBは遅延したDNA複製が完了した後も観察されないので、複製との共役とは独立にDSB形成が,Hsk1により制御される可能性が示唆された。通常、減数分裂前DNA複製の間にリン酸化され、第一減数分裂期に消失するCdc2のTyr15のリン酸化は、hsk1-89では消失せず維持されたままであった。減数分裂期におけるhsk1-89のこれらの欠損は、チェックポイント関連遺伝子であるcds1およびchk1遺伝子を不活性化しても相補されず、唯一、hsk1^+cDNAを増産した時のみ相補された。一方、減数分裂期特異的に誘導される組み換え遺伝子rec6,7,8,12の発現およびhorsetail movementに関しては正常であった。さらに、ade6-M26部位においてDNA二重鎖切断に先立って起こるクロマチンの構造変換がhsk1-89では誘導されなかった。以上の結果は、Hsk1キナーゼが、減数分裂期DNA複製のみならず、減数分裂期組み換え過程にクロマチンリモデリングの制御を介して関与する可能性を示唆する。

Saccharomyces cerevisiae, Cdc7 yeast, mitotic yeast, Hsk1 yeast, somatic cell cycle, cell cycle, cell The diploid strain of hsk1 thermosensitive strain (hsk1 -) leads to mitosis in the process of mitosis, and the first nuclear antigen stops the infection. The pat1 (ts) strain was sequenced. The temperature response led to the mitosis process, the hsk1-DNA sequence, the wild-type DNA sequence, the start of DNA replication before mitosis, and the termination of cell cycle. In the mitotic phase group, the DNA double transection (DSB) was first formed. Tissue hotspot