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枯草菌における転写制御系についての解析

枯草芽孢杆菌转录控制系统分析

基本信息

批准号：
03J61544
负责人：
芹澤昌邦
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J61544/
关键词：
枯草菌転写制御二成分制御系 ECFシグマファクター薬剤感受性

项目摘要

1.枯草菌の二成分制御系YdfHIの解析レギュレーターYdfIを枯草菌内で大量に発現させることによりYdfHIを擬似的な活性化状態にすると、ydfJの転写が特異的に誘導された。これにより、in vivoの条件でYdfHIがydfJの発現に影響を与えていることを証明することが出来た。YdfJは薬剤耐性に関与する遺伝子が含まれるRNDファミリーに属する。そこでΔydfJ株及びΔydfHI株を用い薬剤耐性試験を行ったが、明瞭な結果を得ることは出来ていない。本研究で明らかになったYdfHIによるydfJの転写の制御について学術誌に投稿し、受領された。2.枯草菌の二成分制御系YvrGHbの解析YvrGHbは7個の転写ユニット(wprA, wapA-yxxG, dltABCDE, sunA, sunT-bdbA-yolJ-bdbB, yvrI-yvrHa, sigX-rsiX)に対して正方向の、lytABCオペロンの転写に対して負の制御をすることがわかった。WprA、WapA、LytB及びLytCは枯草菌の主要な細砲表層タンパクである。またSigXは細胞表層の恒常性の維持に関与するECFシグマ因子である。枯草菌においてシグマ因子の発現制御を行う二成分制御系は初めての発見である。YvrGHbの制御下にある遺伝子の機能を考慮すると、ΔyvrGHb株では、細胞表層の状態が変化し、外部からの刺激に対する応答性も変化している可能性が考えられた。そこでΔyvrGHb株を用い、薬剤感受性試験を行った結果、アズトレオナム、セフェピム、バシトラシン及びホスホマイシンに対しての感受性が増加することがわかった。また、ΔyvrGHb株では異常な自己溶解が観察された。以上の結果からYvrGHbは枯草菌の細胞表層の状態の維持、安定化に関与する転写制御系である可能性が示唆された。現在これらの結果をもとに、投稿準備を行っている。

1. YdfHI is a two-component control system of Bacillus subtilis. YdfI can be induced in a large amount in Bacillus subtilis. In vivo, YdfHI and ydfJ are the most important factors affecting the development of the disease. YdfJ has been working on a number of issues related to drug abuse. The results of the resistance test were obtained from the ΔydfJ strain and ΔydfHI strain. This study was published in the Journal of Academic Affairs. 2. Analysis of YvrGHb, a two-component control system of Bacillus subtilis, contains seven components (wprA, wapA-yxxG, dltABCDE, sunA, sunT-bdbA-yolJ-bdbB, yvrI-yvrHa, sigX-rsiX), which correspond to the positive direction and the negative direction of lytABC selection. WprA, WapA, LytB and LytC are the main substratum of Bacillus subtilis. SigX is associated with the maintenance of cell surface constancy. A two-component control system for the development of plant growth factors YvrGHb gene function is considered, ΔyvrGHb strain, cell surface state is changed, external stimulus is changed, the possibility of response is examined. The results of the sensitivity test of Δ yvrHb strain, the sensitivity test of Δ yvrHb strain, and the sensitivity test of Δ yvrHb strain were increased. The strain was found to be abnormal in its own dissolution. The above results indicate the possibility of YvrGHb to maintain and stabilize the cell surface of Bacillus subtilis. Now we are ready for the results and submission.