加圧による酵母アミノ酸輸送体のユビキチン化と圧力シグナル伝達機構の解明

压力对酵母氨基酸转运蛋白的泛素化及压力信号转导机制的阐明

• 批准号: 15780065
• 负责人: 阿部 文快
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Japan Agency for Marine-Earth Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15780065/
• 关键词: 出芽酵母S.cerevisiae; トリプトファン輸送体Tat2; ユビキチン化; ユビキチンリガーゼRsp5; 脱ユビキチン化酵素Doa4; 網羅的遺伝子解析; 圧力生理学; Piezophysiology; 高圧増殖変異

出芽酵母Saccharomyces cerevisaeのトリプトファン輸送は高圧や低温への感受性が高く、トリプトファン要求株の増殖はこうした条件下で強く制限される。これまでに、トリプトファン輸送体Tat2の分解が圧力負荷により促進され、その過程はユビキチンシステムに依存することを示してきた。脱ユビキチン化酵素Ubp (Ubiquitin-specific protease)の遺伝子を破壊したところ、doa4,ubp6およびubp14破壊株において高圧・低温増殖能が確認された。これらの遺伝子破壊株ではTat2が安定化していることから、Tat2の圧力制御に脱ユビキチン化も関与する可能性を示唆している。さらなる高圧・低温増殖関連遺伝子の検索を目的とし、4828株からなる酵母遺伝子破壊ライブラリーの網羅的スクリーニングを行った。その結果、遺伝子型がトリプトファン非要求性であるにもかかわらず、317株もが高圧(25MPa)と低温(15℃)への感受性を示した。MIPS (Munich Information Center for Protein Sequences)のカテゴリーに準じてそれらを分類したところ、代謝および転写に関わる遺伝子が多数を占めていることわかった。一方、DNAマイクロアレイにより両条件下での全遺伝子の発現パターンを調べたところ、高圧で誘導される遺伝子の多くは低温で誘導され、逆に高圧で抑制される遺伝子の多くは低温でも抑制されるという顕著な結果が得られた。一方、こうした遺伝子のほとんどは破壊実験の結果に対応していなかった。このことは、必須遺伝子=発現量上昇という単純な図式化が成り立たないことを示している。

Budding Yeast Saccharomyces cerevisae high pressure low temperature high sensitivityく, トリプトファン requires the strain to be reproduced under the conditions of strong restriction and restriction.これまでに, トリプトファン conveyor Tat2 decomposition pressure load によりstim The process of entering and exiting is dependent on the process of entering and exiting. Ubiquitin-specific enzyme Ubp (Ubiquitin-specific protease)の伝子を波壊したところ、doa4,ubp6およびubp14波壊组においてHigh pressure・low temperature growth abilityがconfirmationされた. Ta The pressure control of t2 is controlled by the pressure control system and the possibility of it being controlled.さらなるHigh-pressure and low-temperature propagation related legacy の検SO をpurpose とし, 4828 strains かThe らなるYeast legacy 伝子棊ライブラリーのNATURE's スクリーニングを行った.そのRESULT, がトリプトファン non-required であるにもかかわらず, 317 strains are sensitive to high pressure (25MPa) and low temperature (15℃). MIPS (Munich Information Center for Protein Sequences) Classification of classification , Metabolism および転WRITE に Off わる伝子が大を Account めていることわかった. One party, DNAマイクロアレイにより両under the condition of the complete legacy of the child, the present パターンをadjusted べたところ, high pressure induction of the legacy of the childの多くは Low temperature で inducing され, reverse に high pressure で suppression さ れ る 伝子 の多 く は low temperature で も suppress さ れ る と い う 顕 出 な 出 ら た. One party, こうした弝子のほとんどは波壊実験のRESULT に対応していなかった.このことは, must be left 伝子 = 発 Current amount rises という単pure な図式成が成たないことを Show している.