脳腫瘍に対する免疫治療に伴う遺伝子発現のcDNAマイクロアレイ法による解析

cDNA微阵列法分析脑肿瘤免疫治疗相关基因表达

• 批准号: 15790762
• 负责人: 岡本 禎一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790762/
• 关键词: gloma; dendritic cell; immuno-cell therapy; c DNA array; glioma; immunotherapy; c DNA micro array

本研究の目的は、樹状細胞を用いた免疫治療を施行した悪性脳腫瘍患者における治療前後の遺伝子発現の変化についてc DNAマイクロアレイ法を用いて解析し、本治療に抵抗性を示す宿主免疫応答抑制機構を解明することである。現在、凍結保存された上記検体より、total RNAを単離し、^<33>Pでラベルされたc DNAプローブを作成の準備中である。手術時に得られた組織を用いた免疫組織化学検討にて、樹状細胞を用いた免疫治療前および治療後における腫瘍内浸潤CD8陽性Tリンパ球数は、樹状細胞治療後は治療前に比べ約30倍に増加していた。しかし、腫瘍の拒絶に至るには、腫瘍内浸潤CD8陽性Tリンパ球数の増加は不十分であり、腫瘍細胞が分泌するtransforming growth factor-β (TGF-β)によりCD4+Th細胞による抗腫瘍サイトカイン(IL-2,IL-4,IFN-γ,TNFα)の産生が抑制されていたり、glioma細胞が発言したFas ligandによりエフェクター細胞であるCTLをアポトーシスにさせ、抗腫瘍免疫を抑制しているといった機序が考えられる。今後、cDNAマイクロアレイを用い、遺伝子解析樹状細胞を用いた免疫治療前後における遺伝子の発現の変化を解析する予定である。免疫組織化学法用に、一個のパラフィンブロックに200サンプルの組織を抱埋し、切片を作成することが可能な組織マイクロアレイを作成する予定である。

The aim of this study was to elucidate the mechanism of host immune response suppression by using dendritic cell immunotherapy in patients with malignant tumors before and after treatment and by using DNA sequencing. Now, freeze preservation of the above records, total RNA separation,^<33>P to prepare for the preparation of c DNA. The number of CD8-positive T cells infiltrating the tumor before and after immunotherapy increased by about 30 times compared with that before treatment. The number of CD8 + T cells infiltrating the tumor increased significantly, but the tumor cells secreted transforming growth factor-β (TGF-β), CD4 +Th cells and anti-tumor cells increased significantly.(IL-2,IL-4,IFN-γ,TNFα) production is inhibited, glioma cells express Fas ligand, anti-tumor immunity is inhibited, and mechanisms of inhibition are examined. In the future, the use of cDNA fragments and the analysis of DNA expression in dendritic cells before and after immunotherapy will be determined. Immunohistochemistry was used to prepare a tissue sample of 200 samples.