甲状腺ホルモンの破骨細胞活性化機構に関する研究

甲状腺激素破骨细胞激活机制的研究

• 批准号: 15790785
• 负责人: 府川 悦士
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790785/
• 关键词: 骨粗鬆症; 甲状腺ホルモン; RANKL

研究者は骨芽細胞における甲状腺ホルモンのreceptor activator of NF-κB ligand(RANKL)遺伝子発現調節機構を解明し、甲状腺ホルモンによる破骨細胞の活性化機構を明確にすることを目的とし、正常ヒト骨芽細胞株(NHost)及び、ヒト骨肉腫細胞株(MG63)を甲状腺ホルモン存在・非存在下で培養し、RANKLの誘導について検討した。結果(1)両培養細胞とも甲状腺ホルモン存在下で36〜60時間培養することによって、甲状腺ホルモンの濃度依存的にRANKL mRNAが増加することを定量的RT-PCR法(SYBR-Green Iを用いたreal-time PCR法)を用いて確認した。(2)甲状腺ホルモンのRANKL mRNA増加作用は蛋白合成阻害剤;cycloheximide存在下で消失することから、RANKL遺伝子発現に新たな蛋白合成を要することが示唆された。これらの成績および、RANKL遺伝子のプロモーター領域には明らかな甲状腺ホルモン応答領域が存在しないことから、RANKLは甲状腺ホルモンの一次応答遺伝子ではなく未知の調節因子の介在が示唆されたため、正常ヒトgenomic DNAからRANKL遺伝子のプロモーター領域をルシフェラーゼ発現ベクターに挿入したキメラプラスミド及び同プラスミドのプロモーター領域のdeletion-mutantを作製したが、現在のところ、RANKL遺伝子の甲状腺ホルモン関連応答領域は見いだされていない。今後も甲状腺ホルモンによるRANKLの誘導機構について解明を進める予定である。

To clarify the regulatory mechanism of receptor activator of NF-κB ligand(RANKL) gene production in bone bud cells and the activation mechanism of osteoclasts in thyroid cells, researchers investigated the presence and absence of thyroid cells in normal bone bud cell lines (NHost) and osteoma cell lines (MG63) and the induction of RANKL. Results (1) The quantitative RT-PCR method (SYBR-Green I real-time PCR method) was used to confirm the concentration-dependent increase of RANKL mRNA in cultured cells in the presence of thyroid hormone for 36 to 60 days. (2)The increase of RANKL mRNA in thyroid gland is an inhibitor of protein synthesis; it disappears in the presence of cycloheximide, and RANKL mRNA expression is an inhibitor of protein synthesis. The results of the study are as follows: RANKL gene expression is in the domain of thyroid, RANKL gene expression is in the domain of thyroid, RANKL gene expression is in the domain of thyroid, RANKL gene expression is in the domain of thyroid, RANKL gene expression is in the domain of thyroid. The normal genomic DNA fragments of RANKL gene are not found in the deletion mutant of RANKL gene. The deletion mutant of RANKL gene is found in the deletion mutant of RANKL gene. In the future, the thyroid gland will be activated by RANKL.