静脈麻酔薬のG蛋白結合受容体(サブスタンスP受容体)への作用部位決定

确定静脉麻醉药对 G 蛋白偶联受体（P 物质受体）的作用位点

• 批准号: 15790841
• 负责人: 尾方 純一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790841/
• 关键词: 疼痛転龍機序; サブスタンスP(NK1)受容体; アフリカツメガエル卵母細胞発現系; G蛋白結合受容体; ペントバルビタール; ケタミン; プロポフォール; トラマドール

疼痛の伝達機序とその制御にサブスタンスP(NK1)受容体などタキキニン受容体が関与していることは以前から知られていたが、最近、これらの遺伝子欠損マウスを用いた実験から、サブスタンスP受容体と疼痛制御の関係の詳細が明らかになってきた。吸入麻酔薬は臨床使用濃度で鎮痛効果を発揮するが、その鎮痛作用発現機序の具体的な理論は説明できていない。タキキニン受容体を介した疼痛制御に対する吸入麻酔薬の影響に興味が持たれているが、その機序は一切不明である。最近申請者らは吸入麻酔薬(イソフルラン、エンフルラン、エーテル、ハロセン)が臨床濃度でサブスタンスP受容体を抑制している事実をつきとめた[Anesth Analg.94(1):79-83,2002]。この事実はサブスタンスP受容体が麻酔薬の鎮痛作用に大きく関与していることを示す。一方、幅広く臨床使用されている静脈麻酔薬もサブスタンスP受容体に何らかの影響を及ぼしていると予想されるが、詳しい検討はまったくなされていない。今年度、申請者らは静脈麻酔薬のサブスタンスP受容体に対する影響を検討するため、以下の実施した。1)サブスタンス-P受容体に対する静脈麻酔薬の影響解析アフリカツメガエル卵母細胞発現系は中枢神経に存在するG蛋白結合受容体に対する薬剤の作用を電気生理学的に検討する実験系として現在広く使用されている。アフリカツメガエル卵母細胞にサブスタンスP受容体のcRNAおよびcDNAを注入し、サブスタンスP誘発性カレントに対する静脈麻酔薬(ペントバルビタール、ケタミン、プロポフォール)、鎮痛薬(トラマドール)の影響をVoltage-Clump法を用いて電気生理学的に解析し、静脈麻酔薬(ペントバルビタール、ケタミン)はサブスタンスP受容体を抑制するが、静脈麻酔薬プロポフォールや鎮痛薬トラマドールには抑制作用がないことを証明した。2)サブスタンスP受容体に影響を及ぼす静脈麻酔薬に対する細胞内燐酸化酵素(PKC)の関与の解析現在まで、申請者らは吸入麻酔薬やアルコールが燐酸化酵素Protein Kinase C(PKC)を介してサブスタンスP受容体を抑制していることを明らかにしている。サブスタンスP受容体作用を持つ静脈麻酔薬が存在した場合、燐酸化酵素遮断薬(GF109203X)存在下でもその作用が発揮されるかどうか解析、スクリーニングした。その結果、静脈麻酔薬(ペントバルビタール、ケタミン)の抑制効果はPKCの影響を受けていないことが明らかとなった。現在はサブスタンスP受容体に影響を及ぼす静脈麻酔薬の結合、作用部位の解明をするために、サブスタンスP受容体とセロトニン1A受容体間でキメラ受容体を構成し、さらに静脈麻酔薬が作用、結合するドメインのアミノ酸配列を他のアミノ酸へ置換して、静脈麻酔薬の特異作用部位を同定することを行っている。

Pain の 伝 da machine sequence と そ の suppression に サ ブ ス タ ン ス P (NK1) by the capacity of body な ど タ キ キ ニ ン by let body が masato and し て い る こ と は before か ら know ら れ て い た が, recently, こ れ ら の heritage 伝 son owe loss マ ウ ス を with い た be 験 か ら, サ ブ ス タ ン ス P let body と pain suppression the の masato is の detailed が Ming ら か に な っ て き た. Clinical use concentration inhaled hemp 酔 薬 は で analgesia working fruit を 発 swing す る が, そ の analgesic action 発 の is machine sequence specific は な theory explain で き て い な い. タ キ キ ニ ン を interface by let body し た pain suppression に す seaborne る suction hemp 酔 薬 の influence に tumblers が hold た れ て い る が, そ の machine sequence は all unknown で あ る. Recent applicants ら は suction hemp 酔 薬 (イ ソ フ ル ラ ン, エ ン フ ル ラ ン, エ ー テ ル, ハ ロ セ ン) が clinical concentration で サ ブ ス タ ン ス P by the capacity of body を inhibit し て い る things be を つ き と め た [Anesth Analg, 94 (1) : 79-83200-2). こ の things be は サ ブ ス タ ン ス P by the capacity of body が hemp 酔 薬 の analgesic action に big き く masato and し て い る こ と を す. Clinical use of one party, his design く さ れ て い る vein hemp 酔 薬 も サ ブ ス タ ン ス P by what let body に ら か の influence を and ぼ し て い る と to think さ れ る が and detailed し い beg は 検 ま っ た く な さ れ て い な い. This year, the applicant ら は vein hemp 酔 薬 の サ ブ ス タ ン ス P by the capacity of body に す seaborne る influence を beg す 検 る た め, the following の be applied し た. 1) サ ブ ス タ ン ス -p by let body に す seaborne る vein hemp 酔 薬 の influence analytic ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル oocytes 発 now is は central god 経 に exist す る G protein by let body に す seaborne る 薬 tonic の role を electric 気 physiology に beg す 検 る be 験 department と し て now hiroo く use さ れ て い る. ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル oocytes に サ ブ ス タ ン ス P by the capacity of body の cRNA お よ び cDNA を injection し, サ ブ ス タ ン ス P 発 sex lure カ レ ン ト に す seaborne る vein hemp 酔 薬 (ペ ン ト バ ル ビ タ ー ル, ケ タ ミ ン, プ ロ ポ フ ォ ー ル) and analgesic 薬 (ト ラ マ ド ー ル) の influence を Voltage - を Clump method used い て electric 気 physiology に parsing し, vein hemp 酔 薬 (ペ ン ト バ ル ビ タ ー ル, ケ タ ミ ン) は サ ブ ス タ ン ス P by the capacity of body を inhibit す る が, vein hemp 酔 薬 プ ロ ポ フ ォ ー ル や analgesia 薬 ト ラ マ ド ー ル に は inhibition が な い こ と を prove し た. 2) サ ブ ス タ ン ス P affected by the capacity of body に を and ぼ す vein hemp 酔 薬 に す seaborne る 燐 acidification enzyme in cells (PKC) の masato and analytical now の ま で, applicants ら は suction hemp 酔 薬 や ア ル コ ー ル が 燐 acidification of enzyme Protein Kinase C (PKC) を interface し て サ ブ ス タ ン ス P by the capacity of body を inhibit し て い る こ と を Ming ら か に し て い る. サ ブ ス タ ン ス P subjected to let body を hold つ vein hemp 酔 薬 が exist し た occasions, interrupt 薬 燐 acidification enzyme (GF109203X) in the presence of で も そ の role が 発 swing さ れ る か ど う か parsing, ス ク リ ー ニ ン グ し た. そ の results, vein hemp 酔 薬 (ペ ン ト バ ル ビ タ ー ル, ケ タ ミ ン) の inhibition of unseen fruit は PKC の を by け て い な い こ と が Ming ら か と な っ た. Now は サ ブ ス タ ン ス P affected by the capacity of body に を and ぼ す vein hemp 酔 薬 の combination, function parts の interpret を す る た め に, サ ブ ス タ ン ス P by the capacity of body と セ ロ ト ニ ン 1 a by the capacitors between で キ メ ラ let body を constitute し, さ ら に vein hemp 酔 薬 が function, combining す る ド メ イ ン の ア ミ ノ acid with column を he の ア ミ ノ acid へ replacement し て, vein hemp The specific sites of action of 酔 drugs and toxins を are determined in the same する とを とを row って る る る.

项目成果

Ogata J., et al.: "A forskolin derivative, colforsin daropate hydrochloride, inhibits rat mesangial cell mitogenesis via the cyclic AMP pathway"Pharmacology. 69・3. 127-131 (2003)

Ogata J., et al.：“毛喉素衍生物，考福辛达罗帕特盐酸盐，通过环 AMP 途径抑制大鼠肾小球系膜细胞有丝分裂”药理学 69·3 (2003)。

Okamoto T., et al.: "The inhibitory effects of ketamine and pentobarbital on substance P receptors expressed in xenopus oocytes"Anesthesia & Analgesia. 97・1. 104-110 (2003)

Okamoto T.等人：“氯胺酮和戊巴比妥对非洲爪蟾卵母细胞中表达的 P 物质受体的抑制作用”麻醉与镇痛 97・1（2003 年）。