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スタチンによる象牙質再生と歯髄覆罩材への応用の可能性

使用他汀类药物再生牙本质的可能性及其在牙髓覆盖材料中的应用

基本信息

批准号：
15791099
负责人：
瀬戸浩行
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

[目的]歯科治療における歯髄組織の保存は、患歯の予後を左右する上で重要である。生活歯として歯を維持するためには、細胞レベルでの積極的な硬組織誘導能をもつ覆髄剤の開発が望まれるが、現在そのような効果を持つ覆髄剤はない。スタチン製剤は高脂血症の治療薬として用いられているが、最近硬組織に対して石灰化促進作用をもつことが報告されている。そこで、今回培養歯髄細胞を用いてスタチンの硬組織形成に対する影響を調べ、スタチンの覆髄剤としての可能性を分析した。[材料および方法]ラット歯髄細胞は、7週齢ウイスター系ラットから上顎前歯より歯髄を取り出した後トリプシンにて処理し分離した。ラット歯髄細胞は3,000cells/cm^2の密度で播種し、10%ウシ胎児血清添加EMEM培地にアスコルビン酸(50μg/ml)、β-グリセロリン酸(2mM)を添加した培地にて培養した。その後コンフルエントに達した4日目から上記培地にスタチン製剤であるシンバスタチンを1、2、5μMの濃度となるよう調整した培地に交換し、最長15日間培養を行った。シンバスタチンによる歯髄細胞への作用を調べるために、培養10日目に(1)ALP活性を測定し、(2)RT-PCR法にて骨基質蛋白であるオステオカルシン(OCN)及び骨形成因子BMP-2のmRNAの発現を調べた。(3)培養14日目に形成される石灰化結節の面積をvon Kossa染色することにより測定した。[結果](1)シンバスタチンはALP活性を濃度依存的に促進した。(2)シンバスタチンはOCNおよびBMP-2のmRNA発現を増強した。(3)シンバスタチンは高濃度添加実験群において石灰化結節形成を促進した。[結論]スタチンはラット歯髄細胞のBN形成を促進し、その過程でALP活性およびOCN、BMP-2の発現促進が認められた。このことから、スタチンには歯髄細胞の硬組織形成能を誘導する作用があることが示唆された。

[Objective] The preservation of dental tissue is very important in dental treatment. The active hard tissue-inducing energy of the living tissue is maintained in the cell, and the active hard tissue-inducing energy is maintained in the cell. The treatment of hyperlipidemia by the treatment of hyperlipidemia is reported in the recent study of calcification promotion in hard tissues. This paper analyzes the possibility of regulating the formation of hard tissue in cultured dental cells. [Materials and Methods] The cells were isolated at 7 weeks after treatment. The cells were seeded at a density of 3,000 cells/cm^2 and cultured in the presence of 10% fetal serum supplemented with EMEM culture medium supplemented with alpha-hydroxy acid (50μg/ml) and beta-hydroxy acid (2mM). After 4 days of cultivation, the concentration of 1, 2 and 5μM was adjusted to 15 days of cultivation. (1) Determination of ALP activity;(2) Regulation of mRNA expression of bone matrix protein (OCN) and bone morphogenetic factor BMP-2 by RT-PCR. (3)The area of calcified nodules formed on day 14 of culture was determined by von Kossa staining. [Results](1) Concentration dependence of ALP activity (2)The mRNA expression of OCN and BMP-2 in the cells of the mice was increased. (3)High concentrations of calcium carbonate promote the formation of calcified nodules. [Conclusion] The growth of BN and the expression of ALP, OCN and BMP-2 were promoted during the process of cell regeneration. The effect of the hard tissue formation of the cells was studied.