口腔粘膜下結合組織新生のティッシュ・エンジニアリングに関する形態免疫学的研究

口腔粘膜下结缔组织新生组织工程的形态免疫学研究

• 批准号: 15791147
• 负责人: 吉村 建
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791147/
• 关键词: 結合組織; ティッシュ・エンジニアリング; 細胞間シグナリング; 細胞生物学; サイトカイン; 細胞外基質; 成長因子

1)8週齢マウス口蓋粘膜下組織内分離継代培養線維芽様細胞(2×10^5)への各種生理活性物質刺激によるZymoGraphyアッセイLPS・1L-1・TGFb・VEGF・LPS+VEGF・IL1+VEGFで24時間刺激後培養上清と細胞を回収し、Pro-MMP-9,MMP-9,Pro-MMP-2,MMP-2,MMP-3アッセイを行なった。細胞成分において全てにPro-MMP-2が検出されたが、1L-1・1L-1+VEGFにおいて刺激時にのみPro-MMP-9が検出された。2)マウス口蓋粘膜下組織内分離継代培養線維芽様細胞への各種生理活性物質刺激によるウエスタンブロットTIMP2アッセイ細胞成分においてコントロールでTIMP-2の反応はやや弱く、IL-1・LPS+VEGF刺激でTIMP-2の反応はやや強かった。培養上清に反応は殆んど見られなかった。3)マウス由来培養綜維芽細胞株への各種生理活性物質刺激によるZymoGraphyアッセイ細胞成分ではPro-MMP-2は全てに見られ、いくつかに弱いMMP-2が検出された。4)マウス由来培養線維芽細胞株への各種生理活性物質刺激によるウエスタンブロットTIMIP2アッセイ細胞成分では弱い反応が見られたが、培養上清に反応は見られなかった。5)12週齢マウス結合組織過形成実験モデル皮膚のサイトカイン刺激マイクロダイアリシス採取液のウエスタンブロットMMP-2分析サイトカイン刺激と同時に採取した透析液をウエスタンブロットにて分析したが検知できなかった。細胞応答が遅い事を示唆するが、追試していく所存である。なお、上記実験とともに、3T3-Primaryともに浮遊している細胞を採取し、Zymographyを行なったところ、非常に強いMMP-2ファミリーの反応が培養上清・細胞成分の両方に見られた。この所見について今後詳細に検討したい。

1)8 Cultured cells (2×10^5) were isolated from the submucosal tissue of the ostium and stimulated by various physiologically active substances. LPS·1L-1·TGFb·VEGF·LPS+VEGF·IL1 +VEGF for 24 hours. The supernatant of cultured cells recovered and pro-MMP-9,MMP-9,Pro-MMP-2,MMP-3 were stimulated. Pro-MMP-2 and Pro-MMP-9 were detected in all cell components and 1L-1·1L-1+VEGF in all cell components. 2) The TIMP-2 response to various physiologically active substances stimulated by TIMP-2 in cultured cells isolated from submucosal tissue of the submucosa was weak, and the TIMP-2 response to IL-1·LPS+VEGF stimulation was strong. The culture supernatant is not clear. 3) Pro-MMP-2 was detected by Zymography-activated cell components stimulated by various physiologically active substances in cultured cells. 4) It is derived from the culture line of the cell line and stimulated by various physiologically active substances. 5)12 In combination with tissue formation, MMP-2 analysis of tissue stimulation and dialysis fluid The cell answers to questions and answers. 3-T3-Primary cell culture supernatant, Zymography supernatant, MMP-2 supernatant and cell composition This is what we see. We'll look into it in detail.