神経軸索の再生とその阻害におけるアクチン細胞骨格の制御機構の解明

阐明肌动蛋白细胞骨架在神经轴突再生及其抑制中的控制机制

• 批准号: 04J03337
• 负责人: 遠藤 光晴
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J03337/
• 关键词: MAG; Nogo; LIMキナーゼ; コフィリン; アクチン細胞骨格; 軸索再生

中枢神経系における神経再生阻害分子であるnogoおよびMyelin associated glycoprotein (MAG)は小脳顆粒細胞の神経突起伸長を阻害する。ラット小脳顆粒細胞において、MAGの刺激は、細胞内のLIMキナーゼ1(LIMK1)の活性上昇を引き起こしたが、Nogoで刺激した場合においてもLIMK1の活性に影響するかを検討したところ、刺激後15分でLIMK1の活性が約1.3倍まで上昇することがわかった。従って、MAG、NogoともLIMK1の活性化を引き起こすことが示された。一方、LIMKの基質であるコフィリンについて、MAGおよびNogo刺激によるリン酸化レベルの変化を測定した。その結果、コフィリンリン酸化レベルの低下が認められた。従って、MAG, Nogo刺激によって、LIMK1だけでなくホスファターゼであるSlingshot (SSH)も活性化している可能性が示唆された。LIMKとSSHの関与について検討するため、発現抑制効果のあるラットLIMK1,LIMK2,SSH1,SSH2のRNAiプラスミドを作成した。小脳顆粒細胞に対して、エレクトロポレーションにより、RNAiプラスミドを導入することができた。MAGの神経突起伸長阻害作用を検討するため、MAGを安定に発現するCHO細胞株を作成した。このCHO細胞上で小脳顆粒細胞を培養することで、MAGによる神経突起伸長阻害が認められた。

The neurogenesis inhibitor in the central nervous system is nogo and Myelin associated glycoprotein (MAG), which inhibits neuronal process elongation in granular cells. The activity of LIMK1 increased approximately 1.3 fold after 15 minutes of stimulation. The activation of MAG, Nogo and LIMK1 was initiated. A party, LIMK matrix, MAG and Nogo stimulation, MAG and Nogo stimulation. As a result of this, the company will continue to improve its quality and efficiency. The possibility of Slingshot (SSH) activation is indicated by the presence of MAG, Nogo and LIMK1. LIMK and SSH are related to the detection and detection of the occurrence of inhibition effects. LIMK1,LIMK2,SSH1,SSH2 are related to RNAi detection. Small granule cells are introduced into the cells. A CHO cell line was constructed to study the inhibitory effect of MAG on neuronal elongation. These CHO cells are cultured in micro-granular cells and are resistant to neuronal elongation.