シアノバクテリアにおける時計蛋白質複合体の解析

蓝细菌中时钟蛋白复合物的分析

• 批准号: 04J05806
• 负责人: 景山 伯春
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J05806/
• 关键词: 概日時計; シアノバクテリア; 相互作用; リン酸化

シアノバクテリアの概日時計の発振に必須である時計蛋白質KaiA,KaiB,KaiCは当研究室が発見し,集中的に解析されている.これらの蛋自質は,相互作用することにより生物時計の中心振動体を形成していると考えられている.これらの相互作用様式を解析することで,概日リズムのメカニズムを解明することを本研究では目的としている。これまでに行った解析とその方法は,(i)シアノバクテリア細胞抽出液を用いて概日周期上のKai蛋白質間相互作用の変動を詳細かつ正確に確認すること,(ii)recombinant Kai蛋白質を用いてin vitroで相互作用のkineticsを調べることである。これらの解析は,数ある体内時計をもつ生物の中でもシアノバクテリアで実験することがもっとも容易であり,生物時計の発振機構を調査するのに有効な手段であると考えられる.現在までに,kai蛋白質が細胞内でリズミックに結合と解離を繰り返して巨大な複合体を形成していることを明らかにし,さらにKaiA,KaiB,KaiCが形成する時計蛋白質複合体の大まかなストイキオメトリーを解明した(Kageyama et al., J.Biol.Chem., 2003).さらにKaiCに対する翻訳後修飾であるリン酸化の解析において,KaiA蛋白質のリン酸化型KaiCへの結合がKaiABC複合体形成に必須な反応であることを示した(Nishiwaki et al., PNAS, 2004)。

The time-dependent proteins KaiA,KaiB,KaiC were found in the laboratory and analyzed intensively. The interaction between the protein and the mass forms the central vibration body of the biological timepiece. The interaction between the two groups was analyzed and the purpose of this study was discussed. This analysis method includes: (i) detailed confirmation of Kai protein-protein interactions in vitro using recombinant Kai protein extracts; and (ii) identification of recombinant Kai protein-protein interactions in vitro using recombinant Kai protein. The analysis of this problem is not easy, but it is easy to investigate the vibration mechanism of the biological timepiece. Now,kai proteins are combined and dissociated in cells, and large complexes are formed. Now KaiA,KaiB,KaiC are formed, and large complexes of kai proteins are formed (Kageyama et al., J.Biol.Chem., 2003). In addition,KaiA protein is involved in the formation of the KaiABC complex, which is necessary for the formation of the KaiABC complex (Nishiwaki et al., PNAS, 2004)。

项目成果

Role of KaiC phosphorylation in the circadian clock system of Synechococcus elongatus PCC 7942

• DOI: 10.1073/pnas.0403906101
• 发表时间: 2004-09-21
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Nishiwaki, T;Satomi, Y;Kondo, T
• 通讯作者: Kondo, T