発生期マウス網膜において領域特異的な発現を示す新規免疫グロブリン様分子の機能解析

一种新型免疫球蛋白样分子的功能分析，显示发育中的小鼠视网膜中的区域特异性表达

• 批准号: 04J06879
• 负责人: 米原 圭祐
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The Graduate University for Advanced Studies
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J06879/
• 关键词: 網膜; 軸索; 領域特異的投射; 上丘; 外側膝状体; 網膜神経節細胞; 副視覚系; サブタイプ; ターゲティングマウス; 視神経; 免疫グロブリン

発生期マウス網膜において背側特異的に発現する新規免疫グロブリン様分子であるmBsp1のターゲティングマウスの解析を行うことにより、mBsp1の生理機能を明らかにする研究を行った。本研究においてはまず、マウスの発生を追って脳の各部位におけるmBsp1のmRNAの発現パターンを詳細に解析した。mBsp1の網膜における発現は視神経軸索が伸長を開始する時期から観察され、その領域特異的な発現は生後半年でも維持されていた。また、mBsp1の発現は嗅球、大脳皮質、大脳辺縁系、小脳、脊髄などの広い領域で観察された。その後、当研究室においてmBsp1ターゲティングマウスの作出に成功した。このマウスの網膜から上丘への領域特異的投射の解析を蛍光性トレーサー色素であるDiIを用いて行ったところ、背側網膜由来の神経節細胞軸索の一部が上丘内において本来の投射先とは異なる位置に神経終末を形成していることが明らかとなった。また、蛍光ラベルされたコレラトキシンを用いて両眼から外側膝状体への投射を解析したところ、対側及び同側の眼球からの投射の分離は正常に起きていたが、同側の眼球から投射を受ける層が野生型マウスと比較して拡大していることが明らかになった。また、mBsp1の遺伝子座にノックインされたGFPが効率よく視神経軸索末端まで運ばれるとが明らかになったので、GFPを指標としてmBsp1を発現する網膜神経節細胞の中枢への投射先を明らかにする解析を行った。その結果、GFP陽性の軸索の投射は上丘及び外側膝状体背側核の一部、視蓋前域の一部、及び副視覚系に観察されたが、外側膝状体腹側核や視床下部の視交差上核などには観察されなかった。これらの結果から、mBsp1は視神経の視中枢への精緻な神経結合の形成に関与していること、またその発現は網膜神経節細胞の一部のサブタイプのみに観察されることが明らかになった。

The development of a new immune response molecule called mBsp1 and its analysis during the development phase of the retina and the development of a dorsal-specific response to mBsp1 were studied. In this study, we analyzed the mRNA expression of mBsp1 in various parts of the genome. mBsp1 's retinal appearance was observed during the initial period of axonal elongation, and its domain-specific appearance was maintained for half a year. The expression of mBsp1 was observed in olfactory bulb, cortex, cortex, cortex and cortex. After the research, mBsp1 was successfully completed. The analysis of domain-specific projections in the superior colliculus and the dorsal retina was carried out in different positions. The separation of the projections of the lateral geniculate body from the normal, contralateral, and ipsilateral eyeballs is normal. The projections of the ipsilateral eyeballs from the normal, contralateral, and ipsilateral eyeballs from the wild type are relatively large. The GFP gene was detected at the locus of mBsp1, and the GFP gene was detected at the distal end of the retinal axon. The results showed that the projections of GFP-positive axons were observed in the superior colliculus and a part of the dorsal nucleus of the lateral geniculate body, a part of the anterior optic tectum, and a part of the accessory optic system, and in the ventral nucleus of the lateral geniculate body and a part of the inferior optic bed. As a result, mBsp1 is related to the formation of fine neuronal junctions in the optic nerve and the optic center, and the development of a part of retinal ganglion cells.