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食品アレルギー治療のための食品アレルギーメカニズムの解析-IgEレセプター高発現B細胞移入動物を利用した基礎的検討-

分析食物过敏治疗的食物过敏机制 - 使用高 IgE 受体表达的 B 细胞转染动物的基础研究 -

基本信息

批准号：
15790331
负责人：
倉本雄一郎
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Kitasato Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790331/
关键词：
ローズベンガル IgE in vivo ε鎖mRNA ε鎖胚型転写物

项目摘要

これまでに、マウスBリンパ腫WEHI-279細胞株をローズベンガルと共に培養後、培養上清中および細胞破砕液中のIgE濃度をELISA法にて測定したところ、ローズベンガルを終濃度100μMで添加したとき培養上清中および細胞破砕液中双方で実験対照群に比して高濃度のIgEが検出された。さらに、WEHI-279細胞を終濃度100μMのローズベンガルと共に培養し、培養後の生細胞中ε鎖mRNAおよびε鎖胚型転写物をRT-PCR法にて測定したところ、実験対照群に比して強いε鎖mRNA発現が認められた。一方、実験対照群とローズベンガル添加群のε鎖胚型転写物発現は同程度であった。以上の結果より、ローズベンガルによるWEHI-279細胞株のε鎖mRNA発現増強およびIgE産生促進作用が示唆された。一方、ローズベンガルはε鎖胚型転写物発現を増強しなかったことから、IgMからIgEへのクラススイッチに影響を及ぼさないことが推察された。そこで、本年度においてはBALB/cマウスを用い、BALB/cマウス脾臓細胞の抗体産生に及ぼす経口投与したローズベンガルの影響について、培養上清中のIgE抗体濃度を指標として検討した。その結果、ローズベンガル経口投与群由来の脾臓細胞培養液中IgE濃度はPBS経口投与群(コントロール)に比して低かった。一方、ロースベンガル経口投与開始2日後にLPSおよびIL-4を腹腔内に投与したマウス由来の脾臓細胞培養液中IgE濃度はPBS経口投与群に比して高かった。以上の結果より、ローズベンガルは単独ではIgE産生を増強しないが、LPS+IL-4存在下ではIgE産生を増強することが示唆された。

The IgE concentration in culture supernatant and cell lysis solution of WEHI-279 cell line after co-culture was determined by ELISA method. The final concentration of IgE in culture supernatant and cell lysis solution was 100μM. In addition, WEHI-279 cells were cultured at a final concentration of 100μM. The expression of ε-lock mRNA and ε-lock mRNA in cultured cells was determined by RT-PCR. A group of lock-type writing objects appear to the same extent. These results indicate that the expression of c-lock mRNA in WEHI-279 cell line is enhanced and IgE production is promoted. On the one hand, the development of RORAMBI's anti-virus writing materials has increased, and the impact of IgM and IgE on the development of anti-virus messages has been investigated. This year, the concentration of IgE antibody in culture supernatant was measured as an indicator of the effects of BALB/c administration, antibody production by BALB/c spleen cells, and cell culture. Results: IgE concentration in culture medium of spleen cells derived from PBS administration was lower than that in culture medium of spleen cells derived from PBS administration 2 days after the start of LPS administration, IgE concentration in culture medium of spleen cells derived from LPS administration was higher than that of PBS administration. The results showed that IgE production was enhanced in the presence of LPS+IL-4 alone.