タンパク質ベクターを用いたドラッグデリバリーシステムの開発

使用蛋白质载体开发药物递送系统

• 批准号: 16790065
• 负责人: 柴田 真理
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nagahama Institute of Bio-Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790065/
• 关键词: タンパク質ベクター; 破傷風菌; ジフテリア; 毒素; ドラッグデリバリー; クローニング; ラージドメイン; スモールドメイ; PCR

破傷風菌やジフテリア菌が産出する毒素は大小二つの球形のタンパク質複合体領域をつなげたひょうたん型である。大きな球の部分はラージドメイン(C断片、95kDa)と呼ばれるタンパク質複合領域であり、毒素を脳や脊髄等の中枢神経に運ぶ役割を果たしていると報告されている。しかし、ラージドメインだけでは毒素を運ぶことはできず、スモールドメインが必要となるが、同じ破傷風菌のスモールドメインと結合すると毒素となるため、使用できない。そこで、ジフテリア菌のスモールドメイン(B断片、37kDa)と破傷風菌のラージドメインを結合したものを作成することとした。破傷風菌のラージドメインを得るために、破傷風菌毒素の遺伝子配列2873番目から4228番目(Tbta-L)をpQE30へクローニングした。ジフテリア菌からは毒素のスモールドメインをコードする部分は、その配列から2種類考えられたため、ジフテリア毒素の遺伝子配列1521番目から1980番目(Diph-S-long)と1521番目から1810番目に12塩基配列を付加したもの(Diph-S-short)もPQE30にクローニングした。また、これらのタンパク質が中枢神経系へ運搬されるかどうか検証するため、GFP遺伝子を下流に組み込んだものを作製した。同様に本実験の目的であるTeta-L、Diph-SとGFP遺伝子を繋げたものも2種類作製した。現在、以上4種のタンパク質精製を行っており、今後はこれらのタンパク質が中枢神経系へ運ばれるかどうかを検証していく。

Tetanus bacteria produce toxins that are spherical in size and complex in size. The results of the central nervous system transport of large globules (C fragment, 95kDa) and large globules (C fragment, 95kDa) were reported. The toxin is transported, transported, and used in conjunction with tetanus. The gene of tetanus (B fragment, 37kDa) and tetanus (B fragment, 37kDa) was synthesized by combining the gene of tetanus with the gene of tetanus. Tetanus toxin gene sequence 2873 sequence 4228 sequence (Tbta-L) pQE30 sequence. The toxin is classified into two groups: Diph-S-long, Diph-S-short, Diph-S-long, Diph-S-long, Diph-S-short, Diph-S-short, Diph-S The central nervous system operates in a variety of ways, such as controlling the flow of GFP. For the same purpose, Teta-L, Diph-S and GFP are produced in two different ways. Now, the above four kinds of quality refinement, in the future, the quality of the central nervous system to transport, to prove