細胞内脂肪滴形成の分子メカニズムに関する研究

细胞内脂滴形成的分子机制研究

• 批准号: 16790076
• 负责人: 深澤 征義
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790076/
• 关键词: 脂肪滴; 変異株; 脂質

脂肪滴はほぼ全ての体細胞に認められるオルガネラで、中性脂質貯蔵・膜脂質代謝・エネルギー産生などに密接に関与すると考えられているがその形成過程については不明な点が多い。医学薬学的見地からも脂肪滴は肥満・脂肪肝等の本因であり、その形成メカニズムを知ることは、これらに付随した病態の解析・治療に有用である。そこで、本研究は体細胞変異株を用い細胞内脂肪滴の形成メカニズムに重要な因子ついて明らかにすることを目的としている。本年度(平成17年度)は平成16年度に樹立した脂肪滴の形成不全細胞株LDD-1の性状解析を行い、欠損遺伝子の同定を行った。具体的には以下である。様々な放射標識中性脂質前駆体(各種脂肪酸、コレステロール、酢酸等)を用い代謝標識実験を行い、産物の同定からLDD-1株は脂肪酸生合成が完全に欠損していることが明らかとなった。脂肪酸生合成に関わる生合成酵素の試験管内活性を検討した結果、LDD-1株は細胞質アセチルCoAカルボキシラーゼ活性が完全に欠損していることがわかった。実際にLDD-1株ではこの活性をになうアセチルCoAカルボキシラーゼ1分子に変異部位が存在することも確認された。LDD-1株は脂肪滴形成に対しsemi-recessive表現型を示し、野生型アセチルCoAカルボキシラーゼ1分子をLDD-1株に発現させると、アセチルCoAカルボキシラーゼ活性の回復とともに、脂肪滴形成も回復することが確認された。これらの結果から、アセチルCoAカルボキシラーゼ1分子が、高等動物細胞(CHO細胞)における細胞内脂肪滴形成に必須の役割を果たしていることを示すことができた。

Fat droplets are produced in the whole body cell, neutral lipid storage, membrane lipid metabolism, and the formation of lipid droplets. Medical science insight into the causes of fatty liver, fatty liver, etc. This study is aimed at studying the role of intracellular lipid droplet formation in somatic cell differentiation. This year (Heisei 17), we started to analyze the characters of LDD-1, which is a defective cell line with fat drop formation, and started to identify defective seeds. Specific. The radioactive label neutral lipid precursor (various fatty acids, cholesterol, acetic acid, etc.) is used to identify the metabolic process, and the product is determined. LDD-1 strain is completely deficient in fatty acid synthesis. The activity of fatty acid biosynthesis enzymes in the cytoplasm of LDD-1 strain was completely impaired. In the meantime, LDD-1 strain has been identified as having different molecular sites. The LDD-1 strain showed a semi-recessive phenotype for lipid droplet formation, and the wild type showed a reverse phenotype for lipid droplet formation. The results of this study are as follows: 1. The intracellular fat droplet formation in higher animal cells (CHO cells) is necessary for the production of lipid droplets.