虚血再灌流心筋傷害に対し保護的に働く心臓線維芽細胞由来物質の治療的役割と同定

鉴定心脏成纤维细胞衍生材料预防缺血再灌注心肌损伤的治疗作用

• 批准号: 16790424
• 负责人: 中里 和彦
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790424/
• 关键词: 心筋保護; 虚血・再還流傷害; ランゲンドルフ灌流心; 培養心筋細胞; 低酸素; 心筋細胞; 心臓線維芽細胞; 虚血再灌流障害; 細胞保護因子; 心臓の拡張機能

心臓線維芽細胞(以下線維芽細胞)が心筋保護因子を産生するという仮説の元に、分離心筋細胞を用いた細胞学的検討とランゲンドルフ灌流心モデルを用いた生理学的検討を行った。1)細胞学的検討新生仔ラット心筋細胞の低酸素条件下における培養実験(72時間)において、線維芽細胞培養上清を用いた群では対照群(血清無添加DMEM)に比べ有意に心筋細胞の生存率が高かった(41.4±3.6%vs.20.5±1.2%,P<0.01)。このような低酸素負荷に対する心筋細胞保護効果は培養時間12時間以降の繊維芽細胞の上清でみられ、それより短い準備時間(0〜6時間)の培養上清では効果が認められなかった。この結果は心筋細胞保護活性を持つ因子が、培養繊維芽細胞で産生、さらに分泌されることを示唆していると考えられた。2)生理学的検討ラットのランゲンドルフ虚血-再灌流心モデルにて、生理学的効果を検討したところ、線維芽細胞の培養上清による前処置は、左室発生圧や左室拡張末期圧などの各種パラメータを改善し、心筋虚血・再灌流傷害を軽減した。さらに心筋梗塞モデルにおいても梗塞サイズを縮小させる効果を有していた。これら線維芽細胞培養上清の心筋保護メカニズム解明の第一歩として、ミトコンドリアK^+-ATPチャネルの関与について検討した。同チャネルの開口阻害薬である5-hydroxydecanoateは上記虚血-再灌流傷害の軽減作用を減弱させた。これらの結果から線維芽細胞由来因子の心臓保護効果は、主にミトコンドリアK^+-ATPチャネル開口を介すると考えられた。3)心筋保護物質の性状遠心型分子量フィルターを用いて線維芽細胞培養上清を分子量5万で分離したところ、細胞培養系およびランゲンドルフ灌流モデルのどちらにおいても、分子量5万(50K)以上の分画に上述の心筋保護作用が認められた。これまでのところ目的物質の同定には至っていない。

Heart viscera line d bud cells (the line d bud cells) が heart muscle protection factor を produce す る と い う 仮 said の yuan に, separation of heart muscle cells を い た of cytology 検 と ラ ン ゲ ン ド ル フ perfusion heart モ デ ル を with い た physiology 検 line for を っ た. 1) cytology 検 for newborn larvae ラ ッ ト の heart muscle cells under the condition of low acid element に お け る training be 験 (72) に お い て, line d bud cell culture supernatant を with い た group で は polices according to group (serum no added DMEM) に than べ intentionally に が の heart muscle cells survival rate か っ た (41.4 + / - 3.6% vs. 20.5 + / - 1.2%, P < 0. "01). こ の よ う な low acid element load に す seaborne る heart muscle cells to protect working fruit は training time 12 onwards の 繊 d の bud cells supernatant で み ら れ, そ れ よ り い short preparation time (0 ~ 6) の culture supernatant で は unseen fruit が recognize め ら れ な か っ た. こ の results は heart muscle cells protection activity を hold つ factor が, training で 繊 d bud cells, さ ら に secretion さ れ る こ と を in stopping し て い る と exam え ら れ た. 2) of physiology 検 ラ ッ ト の ラ ン ゲ ン ド ル フ empty blood - heart perfusion モ デ ル に て, physiology services fruit を beg し 検 た と こ ろ, line d bud cell の culture supernatant に よ る 処 before buy は, left ventricular 発 圧 や left ventricular late company, zhang 圧 な ど の various パ ラ メ ー タ を improve し, heart muscle deficiency, blood perfusion damage again, を 軽 minus し た. さ ら に heart muscle infarction モ デ ル に お い て も infarction サ イ ズ を narrow さ せ る unseen fruit を have し て い た. こ れ ら line d bud cell culture supernatant の heart muscle to protect メ カ ニ ズ ム interpret の first step と し て, ミ ト コ ン ド リ ア K ^ + - ATP チ ャ ネ ル の masato and に つ い て beg し 検 た. The following is noted: the effect of the である5-hydroxydecanoate である of the チャネ チャネ opening of the clot is reduced, and the effect is を weakened させた. こ れ ら の results か ら line d bud cell origin is crucial factor の heart protection services fruit は, Lord に ミ ト コ ン ド リ ア K ^ + - ATP チ ャ ネ ル openings を interface す る と exam え ら れ た. 3) heart muscle protection material の characters far heart-shaped molecular weight フ ィ ル タ ー を with い て line d bud cell culture supernatant を molecular weight 50000 で separation し た と こ ろ, cell culture お よ び ラ ン ゲ ン ド ル フ perfusion モ デ ル の ど ち ら に お い て も, molecular weight of 50000 (more than 50 k) draw に の points above の heart muscle protection が recognize め ら れ た. The target substance <s:1> is determined from に に to って な な な.