プロテオミクスを用いたラット大脳皮質におけるカルバマゼピン関連蛋白質の同定

利用蛋白质组学鉴定大鼠大脑皮层卡马西平相关蛋白

• 批准号: 16790705
• 负责人: 長谷川 洋
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790705/
• 关键词: MARCKS; カルバマゼピン; カルシニューリン; プロテオミクス; FK506

気分安定薬は、双極性気分障害の治療薬であり、リチウム、バルプロ酸ナトリウム、カルバマゼピン(CBZ)が用いられている。しかし現在までこれらの気分安定薬に共通の薬理学的作用は不明である。我々はラットにCBZを5週間投与し、大脳皮質においてカルシニューリンAα、カルシニューリンAαRNAが減少しmyrisoylated alanine-rich C kinase substrate(MARCKS)のリン酸化の増加していることを発見した。カルシニューリン減少により起引されたMARCKSのリン酸化の亢進は、神経伝達物質の分泌に関与することから、CBZの薬理作用として重要と考えた。しかし現在まで受容体レベルの機構だけではCBZの薬理作用は充分説明できない点が多くある。そこで今回の研究ではCBZに直説結合する蛋白質を同定し、CBZの薬理作用の解明だけでなく、気分安定薬の共通する作用機序を解明することは、最終的に躁うつ病の原因究明につながる重要なテーマと考えて研究にあたった。CBZをpolyethylene glycolの溶媒に可能な限り可溶化し、0.25M CBZ溶液を作成し、Affi-Gel10にCBZを結合させ、アフィニティーカラムを作成した。このCBZアフィニティーカラムにラット脳から精製した細胞質成分の蛋白質を結合させ、0.25M CBZで溶出した。溶出した溶液をさらに二次元電気泳動後、2D解析システム・バリアブル・イメージアラナイザーを用いて解析した結果、対照カラムと比較してCBZアフィニティーカラムで増加しており、CBZと結合している蛋白質が十数個存在した。この蛋白質の同定をするために質量分析機lon-trap型ESI-MSを使用し、質量分析を行い、蛋白質の同定をした。NBD-FをCBZのアミド基に結合させ蛍光を用い検出可能となる。同定した蛋白質をFITCと結合させ蛍光下で検出可能にしCBZ-NBD-Fを用いることで、CBZと結合蛋白質が直接結合しているかの証明ができることを解明した。

Use diazepam and bisexual drugs to treat the disease, treat the patients, treat the patients with acid and acid, and use the drugs (CBZ). At present, the role of physiology is unknown. We do not know if there is any change in CBZ concentration between 5 and 5, that is to say, we need to know more about the chemical reaction, such as alpha RNA, low concentration of myrisoylated alanine-rich C kinase substrate (MARCKS), acid treatment, and so on. The effect of MARCKS on acidification, the secretion of substances, and the role of CBZ in the regulation of acidification are important. At present, the recipient organization is responsible for the management of CBZ. It is fully understood that there is a lot of information about how to do it. In this study, CBZ was used to study protein homology, CBZ was used to understand the mechanism of action, diazepam and diazepam were used to understand the mechanism of action, and the causes of the most irritable disorder were ascertained. CBZ polyethylene glycol solvent may be limited to solubility, 0.25m CBZ solution may be made, Affi-Gel10 CBZ may be combined with Affi-Gel10 solvent, and Affi-Gel10 solvent may be used as solvent. In this study, CBZ was used to determine the concentration of protein, and 0.25m CBZ was used to dissolve it. After the solution was dissolved, the two-dimensional swimming was performed, and the results were analyzed by 2D analysis. The results were analyzed by CBZ, and the results were compared with the results of two-dimensional swimming, the results of 2D analysis, the results of two-dimensional swimming, the results of 2D analysis, the results of two-dimensional swimming, two-dimensional swimming, two-dimensional analysis, two-dimensional swimming, two-dimensional swimming, Lon- trap-type ESI-MS analyzer is used for quantitative analysis, quantitative analysis is used, and protein is used. The combination of NBD-F CBZ radiography and optical imaging shows that it is possible to detect errors. It is possible that CBZ-NBD-F can be detected under light by the combination of protein FITC and CBZ protein, which can be directly combined with each other.

项目成果

抗うつ薬投与後におけるAkt kinaseリン酸化の変化

服用抗抑郁药后 Akt 激酶磷酸化的变化

• 发表时间: 2005
• 期刊: 日本神経精神薬理学雑誌 25
• 作者: 長田 賢一;他
• 通讯作者: 他

Proteomics to the new analysis for portein mechanism.

蛋白质组学对蛋白质机制的新分析。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Psychiatry 5(2)
• 作者: 長田 賢一;他;K.Osada
• 通讯作者: K.Osada

リチウム長期投与後の変化する蛋白質のプロテオミクス的解析

对长期锂给药后发生变化的蛋白质进行蛋白质组学分析

• 发表时间: 2004
• 期刊: 日本神経精神薬理学雑誌 24
• 作者: 長田 賢一;他;K.Osada;長田 賢一
• 通讯作者: 長田 賢一

気分安定薬バルプロ酸の脱アセチル化と転写機構との関係

情绪稳定剂丙戊酸脱乙酰化与转录机制的关系

• 发表时间: 2005
• 期刊: 精神科 7
• 作者: 長田 賢一;他
• 通讯作者: 他

リチウム長期投与後変化する転写因子の解析

长期锂给药后转录因子变化的分析

• 发表时间: 2004
• 期刊: 精神薬療研究年報 36
• 作者: 長田 賢一;他;K.Osada;長田 賢一;長田 賢一
• 通讯作者: 長田 賢一