肺癌における自己分泌型運動促進因子およびその受容体の発現

自分泌促动力因子及其受体在肺癌中的表达

• 批准号: 16790800
• 负责人: 竹内 健
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: 独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター) (2005)Keio University (2004)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790800/
• 关键词: 遺伝子; AMF; AMF-R; 肺癌; 細胞運動; 細胞運動能; lung cancer; 予後

研究の目的肺癌は日本や米国において第1位の死亡率で診断技術の進歩にもかかわらずその予後の改善は少ない。また、癌細胞の運動能は癌転移や浸潤において重要な役割を担っている。癌細胞の運動能を刺激する自己分泌型運動促進因子であるAutocrine Motility Factor (AMF)は、癌細胞から分泌され、その受容体であるAutocrine Motility Factor Receptor (AMF-R) とともに腫瘍細胞の運動能と転移能を促進すると言われている。今回われわれは、肺癌臨床検体(主に手術症例)を用いて自己分泌型運動促進因子(AMF) およびその受容体(AMF-R)の遺伝子レベル、蛋白レベルでの発現量を計測しAMF,AMF-Rが予後判定や診断、腫瘍マーカーなどに使用できるか判定する。方法手術材料、培養細胞におけるAMF-RのRNAレベルでの発現RNA抽出はこれらの手術材料(切除した検体は切除直後ただちに液体窒素にて凍結し保存。)と培養細胞をsemiconfluentの状態でAGPC法を用いてRNAを抽出し、Real Time (RT)PCR法でAMF、AMF-R検出。結果および研究進捗1.遺伝子レベルにおいて手術検体約30症例よりRNA抽出終了、RT-PCR法によるAMF,AMF-Rの発現量を計測中。肺癌34症例中約27症例においてAMF,AMF-R発現陽性と判定した。2.蛋白レベルにおいて現在抗体作成を施行。約70%で遺伝子レベルと同一の結果が得られている。今後の展望1.遺伝子レベルにおいて。今後症例数を増やし、遺伝子レベルにおいてAMF,AMF-Rが予後や腫瘍マーカーとして使用可能か判定していくとともに、Real Time (RT)PCR法を使用し、術中リンパ節における発現を計測、リンパ節郭清の必要性についても検討していく予定。2.蛋白レベルにおいて。免疫染色により蛋白レベルでの発現量を計測中。なお,これらの手術材料に関しては患者の同意書を得ているものだけを使用しております。

Objective Lung cancer is the first leading cause of mortality in Japan and the United States, and advances in diagnostic techniques have led to improvements. Cancer cell motility is an important factor in cancer metastasis and invasion. Autocrine Motility Factor Receptor (AMF-R) is an autocrine Motility factor that stimulates the motility of cancer cells. In this paper, we use AMF and AMF-R to measure the expression of AMF and AMF-R in lung cancer clinical cases (mainly surgical cases) for diagnosis and tumor diagnosis. Methods: The surgical materials and cultured cells were isolated from AMF-R RNA and then the surgical materials were frozen. AGPC method is used to extract RNA from cultured cells, Real Time (RT)PCR method is used to detect AMF and AMF-R. Results: 1. The detection of AMF and AMF-R by RT-PCR was measured in about 30 cases. About 27 of 34 lung cancer cases were diagnosed as AMF,AMF-R positive. 2. Protein production is now performed. About 70% of the traditional Chinese medicine ingredients and the same results are obtained. Future prospects 1. The evolution of the child's life. In the future, the number of cases will increase, AMF,AMF-R will be used to determine the possibility of use, Real Time (RT)PCR will be used, intraoperative detection will be measured, and the necessity of screening will be discussed. 2. The protein is in the middle of it. Immunostaining is under way to measure the amount of protein that can be detected. The patient's consent form is required for the use of surgical materials.