肺癌における自己分泌型運動促進因子およびその受容体の発現

自分泌促动力因子及其受体在肺癌中的表达

• 批准号: 16790800
• 负责人: 竹内 健
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: 独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター) (2005)Keio University (2004)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790800/
• 关键词: 遺伝子; AMF; AMF-R; 肺癌; 細胞運動; 細胞運動能; lung cancer; 予後

研究の目的肺癌は日本や米国において第1位の死亡率で診断技術の進歩にもかかわらずその予後の改善は少ない。また、癌細胞の運動能は癌転移や浸潤において重要な役割を担っている。癌細胞の運動能を刺激する自己分泌型運動促進因子であるAutocrine Motility Factor (AMF)は、癌細胞から分泌され、その受容体であるAutocrine Motility Factor Receptor (AMF-R) とともに腫瘍細胞の運動能と転移能を促進すると言われている。今回われわれは、肺癌臨床検体(主に手術症例)を用いて自己分泌型運動促進因子(AMF) およびその受容体(AMF-R)の遺伝子レベル、蛋白レベルでの発現量を計測しAMF,AMF-Rが予後判定や診断、腫瘍マーカーなどに使用できるか判定する。方法手術材料、培養細胞におけるAMF-RのRNAレベルでの発現RNA抽出はこれらの手術材料(切除した検体は切除直後ただちに液体窒素にて凍結し保存。)と培養細胞をsemiconfluentの状態でAGPC法を用いてRNAを抽出し、Real Time (RT)PCR法でAMF、AMF-R検出。結果および研究進捗1.遺伝子レベルにおいて手術検体約30症例よりRNA抽出終了、RT-PCR法によるAMF,AMF-Rの発現量を計測中。肺癌34症例中約27症例においてAMF,AMF-R発現陽性と判定した。2.蛋白レベルにおいて現在抗体作成を施行。約70%で遺伝子レベルと同一の結果が得られている。今後の展望1.遺伝子レベルにおいて。今後症例数を増やし、遺伝子レベルにおいてAMF,AMF-Rが予後や腫瘍マーカーとして使用可能か判定していくとともに、Real Time (RT)PCR法を使用し、術中リンパ節における発現を計測、リンパ節郭清の必要性についても検討していく予定。2.蛋白レベルにおいて。免疫染色により蛋白レベルでの発現量を計測中。なお,これらの手術材料に関しては患者の同意書を得ているものだけを使用しております。

研究目标：肺癌是日本和美国的第一死亡率，尽管诊断技术的进步，其预后却很小。此外，癌细胞的运动在癌症转移和侵袭中起着重要作用。自分泌运动因子（AMF）是一种刺激癌细胞运动性的自分泌因子，是从癌细胞中分泌的，据说可以促进肿瘤细胞的运动性和转移潜力以及其受体自动分泌运动因子受体（AMF-R）。在本文中，我们将使用临床肺癌标本（主要是外科手术病例）来衡量自分泌型运动型促运动因子（AMF）及其受体（AMF-R）的基因和蛋白质水平切除后立即在液氮中冷冻，并使用AGPC方法在半流体状态下提取培养的细胞，并使用实时（RT）PCR进行AMF和AMF-R检测。结果和研究进展1。在遗传水平上，RNA提取在大约30个手术样本中完成，并使用RT-PCR测量AMF和AMF-R表达水平。在34例肺癌病例中，大约有27例对AMF和AMF-R表达呈阳性。 2。当前在蛋白质水平上进行抗体产生。基因级相同的结果以约70％的速度获得。未来的前景1。在遗传水平上。我们将来会增加病例的数量，并确定在遗传水平上是否可以将AMF和AMF-R用作预后和肿瘤标记，还将使用实时（RT）PCR来测量术中淋巴结中的表达，并考虑淋巴结清除的需求。 2。在蛋白质水平上。通过免疫染色来测量蛋白质水平的表达水平。此外，仅将患者同意的形式用于这些手术材料。