未分化ES細胞特異的に発現する遺伝子群のエピジェネテックな発現調節機構の解明

阐明未分化ES细胞特异表达基因的表观遗传表达调控机制

• 批准号: 05J02849
• 负责人: 今村 公紀
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J02849/
• 关键词: iPS細胞; 生殖細胞; Mvh; ES細胞; DNA methylation; GS細胞; Oct3; 4; Sox2

近年、当研究室において体細胞に特定の転写因子(Oct4,Sox2,Klf4,c-Myc)を導入することによってES細胞と類似の多能性幹細胞に初期化可能であることが示され、iPS(induced pluripotent stem)細胞と名付けられた。申請者はES細胞と生殖幹細胞の類似と相違に関する研究を行ってきたことから、これまでの知見を生かしてマウスips細胞からin vitroで生殖細胞を分化誘導することを目的として新たに研究を開始した。まず、生殖細胞特異的に発現する遺伝子Mvh(mouse vasa homolog)のプロモーター下に赤色蛍光タンパクであるRFP(red fluorescence protein)遺伝子を導入したトランスジェニックマウスからHepatocyteを単離し、複数クローンのiPS細胞を樹立した。これらのiPS細胞を接着培養、及び浮遊培養で分化誘導したところ、接着培養では解析した12クローン中1クローンでMvh-RFP陽性細胞が確認された。一方、浮遊培養では12クローン中全てのクローンでMvh-RFP陽性細胞が誘導可能であることが確認された。しかし、浮遊培養の細胞凝集塊中に占めるMvh-RFP陽性細胞数は少なく、大多数のMvh-RFP陰性細胞集団の中に混在して存在していた。これらの細胞凝集塊を一旦分離した後に、生殖幹細胞培養条件下で再度浮遊培養すると、Mvh-RFP陽性細胞が比較的均一に集まった細胞凝集塊を形成させることが可能であった。今後はMvh-RFP陽性細胞の遺伝子発現やゲノムインプリンティング、産児形成能力などの解析を行い、in vitro分化誘導で得られたiPS由来生殖細胞と生体内で形成される生殖細胞の比較を行っていく予定である。

In recent years, when the laboratory has a specific writing factor (Oct4,Sox2,Klf4,c-Myc) that is similar to that of pluripotent cells, it is possible to initialize them, while iPS (induced pluripotent stem) cells may be named. The applicant's ES cell reproductive cell type is similar to that of the relative research program, and the applicant is aware that the ips cell is responsible for reproductive cell differentiation and differentiation. The purpose of this study is to start a new study. The baby Mvh (mouse vasa homolog), which is specific to the reproductive cycle, has the red light, the RFP (red fluorescence protein), the red light, the Hepatocyte, the plural, the iPS, and the plural. The iPS cells continue to be cultured, and the floating cells are differentiated to guide the cells, and then to analyze the Mvh-RFP cells in the first half of the 12-month cycle. On the other hand, it is possible to make sure that you have a full range of information on the Mvh-RFP in the first place. There is a small number of cells in the cell agglutination of Mvh-RFP, and there is a small number of cells in most of the cells of Mvh-RFP. Once separated, reproductive cells were cultured again under the condition of cell culture, and the uniform cell agglutination ratio of Mvh-RFP was detected. In the future, Mvh-RFP sexual progenitor cells show that there is a significant difference in the formation of reproductive cells, and the formation of reproductive cells.

项目成果

Transcriptional repression and DNA hypermethylation of a small set of ES cell marker genes in male germline stem cells.

• DOI: 10.1186/1471-213x-6-34
• 发表时间: 2006-07-21
• 期刊: BMC developmental biology
• 作者: Imamura M;Miura K;Iwabuchi K;Ichisaka T;Nakagawa M;Lee J;Kanatsu-Shinohara M;Shinohara T;Yamanaka S
• 通讯作者: Yamanaka S