腸炎ビブリオの鉄獲得系に関する分子遺伝学的研究

副溶血弧菌铁获取系统的分子遗传学研究

• 批准号: 05J03585
• 负责人: 田邊 知孝
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J03585/
• 关键词: 腸炎ビブリオ; 鉄獲得系; シデロフォア; Vibrioferrin; 分子遺伝学

1、VF排出ポンプ遺伝子(pvsC)の解析腸炎ビブリオにおけるvibrioferrinの分泌は主に12回膜貫通型蛋白質であるPvsCにより行われることを示した[Tanabe et al.,Microbiol.Immunol.,in press]。pvsCはvibrioferrin生合成オペロン(pvsABCDE)中にコードされており、このオペロンの転写はFurにより鉄制御されている。PvsCを介して細胞質からペリプラズムに排出されたvibrioferrinがその後どのように外膜を通過し菌体外に排出されるかについては今のところ不明である。しかし最近,大腸菌おけるenterobactinのペリプラズムから菌体外への排出はTolCに依存的であることが遺伝子欠失株を用いた表現型解析により解明された[Bleuel et al.,J.Bacteriol.,187:6701-6707(2005)]。今後,腸炎ビブリオにおけるvibrioferrin排出のための外膜チャネル蛋白質の存在を追求することで,vibrioferrin排出の全体像を解明したいと考えている。2、Vibrioferrin生合成蛋白質(PvsABDE)の精製大腸菌を用いた蛋白大量発現系を利用し、vibrioferrin生合成蛋白質であるPvsA, B, D,及びEについてそれぞれのHis-tag融合蛋白質を発現させた。PvsA, B,及びEのHis-tag融合蛋白質は可溶性発現させることができたが、PvsDのHis-tag融合蛋白質については可溶性発現ができていない。3、PvsABDE蛋白質の機能解析Vibrioferrinは2-ケトグルタル酸、L-アラニン、エタノールアミン、クエン酸の4つの成分から成る。PvsABDEの基質特異性についてはvibrioferrinの構成成分と、PvsABDEの相同性検索の結果から推察した。今後、PvsABDEのHis-tag融合蛋白質を用いて詳細な酵素学的検討を加え、vibrioferrinの生合成経路の全容の解明することは非常に重要である。

1. Analysis of VF excretion protein (pvsC) and secretion of vibrioferrin in the main 12-loop membrane penetrating protein [Tanabe et al., Microbiol.Immunol., in press]。PvsC vibrioferrin synthesis (pvsABCDE) in the case of a chemical reaction, a chemical reaction, a chemical reaction. PvsC is expressed in cytoplasm, vibrioferrin, outer membrane, and is expressed in vitro. Recently, Escherichia coli has been identified by phenotypic analysis of enteroactin production in vitro and TolC dependent production in vitro [Bleuel et al., J.Bacteriol., 187:6701-6707(2005)]。In the future, virioferrin excretion and the existence of outer membrane protein pursuit, virioferrin excretion of the whole picture to explain. 2. Vibrioferrin synthesis of protein (PvsABDE) from purified E. coli. A large number of protein development systems were developed to utilize Vibrioferrin to synthesize proteins such as PvsA, B, D, and E. The His-tag fusion proteins of PvsA, B, and E are soluble and the His-tag fusion proteins of PvsD are soluble. 3. Functional analysis of PvsABDE protein Vibrioferrin is composed of 4 components of 2-hydroxy-4-carboxylic acid, L-hydroxy-4-carboxylic acid, and L-hydroxy-4-carboxylic acid. PvsABDE matrix-specific analysis of vibrioferrin composition, PvsABDE identity analysis of the results from the study In the future, it will be very important to further investigate the enzymatic properties of His-tag fusion proteins and to elucidate the full content of vibrioferrin biosynthesis pathway.

项目成果

A Novel Aerobactin Utilization Cluster in Vibrio vulnificus with a Gene Involved in the Transcription Regulation of the iutA Homologue

• DOI: 10.1111/j.1348-0421.2005.tb03671.x
• 发表时间: 2005-09
• 期刊: Microbiology and Immunology
• 影响因子: 2.6
• 作者: T. Tanabe;Ayaka Naka;H. Aso;H. Nakao;S. Narimatsu;Y. Inoue;T. Ono;Shigeo Yamamoto

Idenrtification and transcriptional organization of aerobactin transport and biosynthesis cluster genes of Bibrio hollisae.

Bibrio hollisae 需氧菌素转运和生物合成簇基因的鉴定和转录组织。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Research in Microbiology (In press)(確約有り)
• 作者: Toru Yamada;Shengji Wu;Eiji Sasaoka;Md.Azhar Uddin;Koichi Suzuki
• 通讯作者: Koichi Suzuki

Involvement of the Vivrio parahaemolyticus pvsC gene in export of the siderophore vibrioferrin.

副溶血弧菌 pvsC 基因参与铁载体弧菌铁蛋白的输出。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Microbiology and Immunology (In press)(確約有り)
• 作者: Toru Yamada;Shengji Wu;Eiji Sasaoka;Md.Azhar Uddin;Koichi Suzuki;Tomotaka Tanabe
• 通讯作者: Tomotaka Tanabe

Identification of an AraC-like regulator gene required for induction of the 78-kDa ferrioxamine B receptor in Vibrio vulnificus.

鉴定创伤弧菌中诱导 78 kDa 铁胺 B 受体所需的 AraC 样调节基因。

• 发表时间: 2005
• 期刊: FEMS Microbiology Letters 249
• 作者: Toru Yamada;Shengji Wu;Eiji Sasaoka;Md.Azhar Uddin;Koichi Suzuki;Tomotaka Tanabe;Tomotaka Tanabe
• 通讯作者: Tomotaka Tanabe