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SHG顕微鏡を用いた細胞-細胞外マトリックス間力学的相互作用に関する動態解析

利用SHG显微镜动态分析细胞与细胞外基质之间的机械相互作用

基本信息

批准号：
16700359
负责人：
福島修一郎
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では非線形光学効果によりコラーゲンから特異的に発生する第2高調波光(SHG光)を観測する顕微鏡を開発し,培養組織中コラーゲンの評価法を確立した.従来のコラーゲン観察法では試料の固定や染色が必要であるのに対し,本顕微鏡は無染色・非侵襲の観察が可能であり,同一試料の経時観察や細胞-コラーゲン間の相互作用の動態解析などに応用できる.本研究で開発したSHG顕微鏡は共焦点レーザー顕微鏡を改造し,モード同期チタン・サファイアレーザーを光源としたものである.透過配置の光電子増倍管で入射レーザー光の半波長のSHG光を,反射配置の光電子増倍管で2光子励起の蛍光をそれぞれ検出して,コラーゲンと細胞をイメージングした.測定試料には培養線維芽細胞を包埋したI型コラーゲンゲルを用いた.観測したSHG顕微鏡画像からコラーゲンの定量的評価指標を得るために,コラーゲンゲルを用いてSHG光強度とコラーゲン構造の関係について検討した.ゲル中のコラーゲン濃度が高くなるとSHG光も比例して強くなった.また,圧縮によりコラーゲンを配向させたゲルからはより強いSHG光が発生した.これらの結果はSHG顕微鏡画像を用いてコラーゲンの量と質を定量的に評価できることを示している.さらに,細胞によるコラーゲンゲルの再構築過程についても検討した.コラーゲンゲルから発生するSHG光強度は細胞の培養期間に伴って増加したことから,培養組織の品質評価にSHG光計測が有効であることが確認できた.

In this study, the results of this study show that the second high light (SHG light) of the non-shaped optical system is effective. In this study, the results of this study are as follows: in this study, the results of this study are as follows: in this study, the results of this study are as follows: in this study, the results of this study show that the second high light (SHG light) is used in the tissue. It is necessary to observe the material for fixed dyeing. This micrometer is used for non-invasive dyeing. It is possible to observe the cell-cell interaction of the same material at the same time. The purpose of this study is to conduct a common-focus micro-reconstruction of the SHG micrometer, and to improve the performance of the light source in the same period. Through the configuration of the photomultiplier tube, the incident photomultiplier half-wavelength SHG light, the reflection configuration, the photomultiplier tube, the 2-photon excitation device, and the excitation device, the output light is excited by the photon multiplier, and the output light is excited by the photon generator. Determine the quality of the material, the culture line, the germ cell, the type I equipment, the equipment, the equipment and the equipment. The SHG micro-portrait shows that the quantitative image means that the light intensity of the SHG light is not strong enough to make it. In the middle of the day, the intensity is high. The SHG light ratio is strong. This is the best way to improve the quality of SHG light. The results show that the SHG micro-portrait shows the accuracy of the image by measuring the quantity of the image. If you don't want to go through the process, you will have to go through the whole process. In order to improve the light intensity of SHG, we need to make sure that the light intensity of SHG is higher than that of SHG.

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

コラーゲンゲルの構造とSHG光強度の関係

胶原凝胶结构与SHG光强度的关系

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
第16回バイオフロンティア講演会講演論文集
影响因子：
0
作者：
R.Nakayama;et al.;中山龍一他
通讯作者：
中山龍一他

培養組織試料の評価方法およびそれを用いた培養組織の製造方法

评价培养组织样品的方法以及使用该方法生产培养组织的方法

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

動脈壁の変形とカルシウム蓄積の関係(弾性モデルによる血流解析と動脈壁内カルシウム含有量計測)

动脉壁变形与钙蓄积之间的关系（使用弹性模型的血流分析和动脉壁钙含量的测量）

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
第18回バイオエンジニアリング講演会講演論文集
影响因子：
0
作者：
K.M.Huh;S.C.Lee;T.Ooya;K.Park;T.Ooya (ed by Abderrazzak Douhal);Namba H;奥岡眞視;遠藤恒介;Kosuke Endo;清水れい子;福島修一郎他
通讯作者：
福島修一郎他

Optical Measurement of Age-Related Calcification in Human Blood Vessels

人体血管中与年龄相关的钙化的光学测量