回帰熱ボレリア菌体表層蛋白抗原のエピトープ解析によるワクチン開発
基于回归热疏螺旋体细胞表面蛋白抗原表位分析的疫苗研制
基本信息
- 批准号:17790294
- 负责人:
- 金额:$ 1.6万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 2006
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Borrelia duttonii VmpP(VlpP)遺伝子を基に30アミノ酸残基に相当する一連の遺伝子断片をPCRにより増幅、これらGST融合蛋白質として大腸菌で発現し、精製VmpPにより作成した抗体との反応性を調べた。VmpP30アミノ酸断片一GST融合蛋白と抗体との反応性を調べた結果、13断片中5断片に抗体反性が認められ、さらにその5断片をそれぞれ3つの15アミノ酸断片-GST融合蛋白として発現させた場合では、VmpPの73-87,155-169,223-237,280-294,342-355のアミノ酸残基に反応性がみられた。抗体反応性断片の合成ペプチドを用いてELISA法を行った結果、VmpPのC末端部分の350-355アミノ酸残基(KAADQQ)に最も強い反応性が認められた。このことよりC末端領域の合成ペプチドが成分ワクチンとして機能する可能性が示唆された。回帰熱ボレリアは2つのファミリーからなる菌体表層蛋白質Vmpを有しており、分子量の大きいVlp(Variable long protein)と分子量の小さいVsp(Variable short protein)から成る。Borrelia turicataeのスナネズミ感染実験においても血液中での回帰が認められ、抗原性の異なる菌体表層蛋白発現が観察された。培地中で培養したときの菌体表層蛋白はVspEであることがペプチド配列解析により判明したので、この蛋白のX線結晶解析による立体構造決定を行った。解析結果より、VspE単体は4つのα-ヘリックス構造からなりライム病ボレリア病原体 Borrelia burgdorferi OspCとアミノ酸類似性は38.6%にもかかわらずきわめて良く似た構造であることが判明した。
Borrelia duttonii VmpP(VlpP) gene fragment 30 amino acid residues corresponding to a sequence of PCR fragments, amplification, GST fusion protein, detection in E. coli, purification, preparation of antibodies and anti-retroviral modulation. VmpP30 fragment-GST fusion protein and antibody reactivity were modulated. Five fragments of VmpP30 fragment-GST fusion protein and antibody reactivity were detected. Three fragments of VmpP30 fragment-GST fusion protein and 15 fragments of VmpP fragment-GST fusion protein were detected. VmpP 73- 87, 155 - 169, 223 - 237, 280 - 294, 342 -355 residues were detected. The results of ELISA for the synthesis of antibody anti-viral fragments showed that the 350-355 amino acid residues in the C-terminal portion of VmpP (KAADQQ) were the strongest anti-viral residues. The possibility that the C-terminal domain is synthesized and the functional domain is displayed The protein Vmp in the surface layer of the bacteria has a high molecular weight and a high molecular weight. Borrelia turicatae is a species of bacteria that can be found in the blood and in the surface proteins of the bacteria. The surface protein of cultured bacteria was determined by X-ray crystallographic analysis. Analysis results showed that the similarity of Borrelia burgdorferi OspC to VspE was 38.6%.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Immunodominant epitope in the C-terminus of a variable major protein in Borrelia duttonii, an agent of tick-borne relapsing fever.
达氏疏螺旋体(一种蜱传回归热病原体)中可变主要蛋白 C 末端的免疫显性表位。
- DOI:
- 发表时间:2006
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Tabuchi;N et al.
- 通讯作者:N et al.
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