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微小粒子状物質による大気汚染の健康影響を評価するための生物学的指標の開発

开发生物指标来评估细颗粒物造成的空气污染对健康的影响

基本信息

批准号：
17790374
负责人：
野崎潤一
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Hyogo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790374/
关键词：
大気汚染微小粒子状物質 PM2.5

项目摘要

要旨目的:粒子状物質による大気汚染は国際的に大きな問題になっており、その健康影響を客観的に評価する方法の開発が期待されている。本研究では、幹線道路沿道でサンプリングした粒子状物質を用いて、in vitroで培養細胞に曝露し、蛋白質の発現を検討した。方法大気中粒子状物質は幹線道路沿道でHigh volume air samplerを用いて捕集した。捕集された粒子(有機物含有粒子)の一部からは有機溶媒で化学物質成分を取り除き、残渣を無機粒子とした。マウス肺上皮細胞株LA-4をディッシュ上に1.4×10^4個/cm^2で撒き、72時問後までに2回(24時間後と48時間後)、各粒子および人工的な炭素粒子Printex90を超音波破砕機によって分散後、培地に混合することによって曝露した。粒子曝露後の細胞数、lactate dehydrogenase(LDH)活性を測定した。細胞から抽出された蛋白質はpH4-7の等電点電気泳動および10%アクリルアミドゲルを用いた二次元電気泳動に展開し、蛍光染色後に蛋白質の発現を解析した。結果LDH活性は無機粒子曝露時でコントロールに比べて0.70倍、有機物含有粒子曝露時で0.84倍と有意に減少したが、Printex90への曝露では変化がみられなかった。それぞれの粒子を曝露した細胞中の蛋白質発現は、粒子種によって共通して増減するものと異なる挙動を示すものがあり、人工的な炭素粒子と環境中から捕集した粒子では、検出された影響に差異が見られた。考察大気環境中から得られた粒子に応答する蛋白質があることが示された。粒子状物質の影響を評価するためには、実際に大気環境中から得られる粒子を用いる必要があると考えられた。

Objective: The development of methods for assessing the impact of particulate matter on health and environmental protection is expected. In this study, the use of particulate matter in vitro and exposure of cultured cells to protein along the main road were discussed. Methods Large volume air sampler is used to collect particulate matter along the trunk road. Part of the trapped particles (organic-containing particles) are removed from organic solvent chemical components and residues are removed from inorganic particles. The lung epithelial cell line LA-4 was dispersed at 1.4×10^4 cells/cm^2, and the particles were dispersed at 72 hours and then exposed to artificial carbon particles Printex90 at 72 hours. Cell count and lactate dehydrogenase(LDH) activity after particle exposure were measured. The isoelectric point of proteins extracted from cells was determined by using two-dimensional electrophoresis at pH4-7. As a result, the LDH activity was 0.70 times higher than that of Kontrol when exposed to inorganic particles, 0.84 times higher when exposed to organic-containing particles, and was intentionally reduced. The change was even more pronounced when exposed to Printex90 feet. The expression of protein in the cells is different from that in the environment. A study of the effects of protein on the environment The impact of particulate matter on the environment