AIRE発現細胞株を用いた末梢組織特異的遺伝子群の転写調節機構の解明

使用表达 AIRE 的细胞系阐明外周组织特异性基因的转录调控机制

• 批准号: 17790675
• 负责人: 山口 良考
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790675/
• 关键词: 免疫学; 胸腺; 免疫学的寛容; 自己免疫疾患; AIRE

遺伝性自己免疫疾患APECED(自己免疫性多腺性内分泌不全症-カンジダ症-外胚葉性ジストロフィー)の原因遺伝子として同定された自己免疫調節遺伝子AIREは、末梢組織特異的遺伝子の胸腺における異所性発現を支配し、免疫学的寛容の成立に関与しているが、AIREを発現する細胞が極めて少ないため、細胞内の機能を生化学的に解析することは非常に困難であった。そこで我々はマウスAire遺伝子プロモーター断片の下流に動物細胞を不死化させる特質を持つSV40ラージT抗原のコーディング領域を融合させたトランスジーンを用いてトランスジェニックマウスを作製し、胸腺由来のAIRE発現細胞株(以下Aire^+細胞株)を樹立した。Aire^+細胞は、胸腺細胞のネガティブセレクションに関与するイムノプロテアソーム特異的サブユニットやAPECED患者血清中自己抗体の標的自己抗原に対する遺伝子(末梢組織特異的遺伝子)群を発現していた。また正常胸腺細胞がAire^+細胞と結合しアポトーシスに陥ることも観察した。これらの結果より、Aire^+細胞株には自己抗原提示細胞としての胸腺上皮細胞に本来備わっている機能が保たれており、AIREの機能を解明するための有用な材料であることが判明した。さらにAire^+細胞を用いて、Aireを過剰発現させた時に転写された、またはAireをノックダウンさせた時に転写が抑制された末梢組織特異的遺伝子の存在が確認され、Aireがそれら遺伝子群の異所性発現を制御している事象を細胞レベルで立証した。

Heritage 伝 sex myself immune disorders APECED autoimmune endocrine gland sex more insufficiency syndrome - カ ン ジ ダ disease - leaf embryonic sex ジ ス ト ロ フ ィ ー) cause of の survived 伝 と し て with fixed さ れ た oneself immunity heritage 伝 son AIRE は, peripheral tissue specific but 伝 の thymus に お け る different sexual 発 を now dominated by し, understanding of the immunological の established に masato and し て い る が, AIRE を 発 now す る cell が most め て less な い た め, intracellular の functional を に of biochemistry analytic す る こ と は very difficult に で あ っ た. そ こ で I 々 は マ ウ ス Aire posthumous son 伝 プ ロ モ ー タ ー fragment の obscene に を animal cells die change さ せ る traits を hold つ SV40 ラ ー ジ T antigen の コ ー デ ィ ン グ field を fusion さ せ た ト ラ ン ス ジ ー ン を with い て ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を as し, thymus origin の Aire 発 now cell line (the following Aire ^ + (Cell line)を establish a た. Aire は ^ + cells and thymus cells の ネ ガ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン に masato and す る イ ム ノ プ ロ テ ア ソ ー ム specific サ ブ ユ ニ ッ ト や APECED patients serum antibody の mark yourself antigen に す seaborne る heritage 伝 child (peripheral tissue specific heritage 伝) group of を 発 now し て い た. Youdaoplaceholder0 normal thymocytes がAire^+ cells と combined with <s:1> アポト シスに陥る シスに陥る と と と 観 観 observe た. こ れ ら の results よ り, Aire ^ + cell lines に は antigen prompt their cells と し て の thymic epithelial cells に originally prepared わ っ て い る function が bartender た れ て お り, Aire の function を interpret す る た め の な useful materials で あ る こ と が.at し た. さ ら に Aire ^ + cells を using い て, Aire を before turning 発 now さ せ た に when planning to write さ れ た, ま た は Aire を ノ ッ ク ダ ウ ン さ せ た に when planning to write が inhibit さ れ た peripheral tissue specific heritage 伝 son の exist が confirm さ れ, Aire が そ れ ら heritage 伝 subgroup の different sex 発 を now by suppression し て い る things like を cells レ ベ ル で testification し た .

项目成果

ホルモンと臨床

激素与临床

• 发表时间: 2006
• 作者: 工藤 純;山口良考;清水信義
• 通讯作者: 清水信義