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高感度定量的プロテオーム解析を用いた糖尿病網膜症の病態解明

使用高灵敏度定量蛋白质组分析阐明糖尿病视网膜病变的病理学

基本信息

批准号：
17791237
负责人：
山根健
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791237/
关键词：
糖尿病網膜症黄斑円孔血漿蛋白質 VEGF FGF Lys修飾試薬 PEDF

项目摘要

今年度は安定同位体による質量分析器を用いたプロテオーム解析をより、高感度、再現性を目標に研究を行った。安定同位体として、広島大学大学院理学研究科泉俊輔氏から提供を受けたLys修飾試薬3H4NBASに加え、市販されているNBS試薬(SHIMADZU)を用いて研究を行った。(1)血漿蛋白質についてTransthyretin、a1-antitrypsin、Hemopexin、Apolpopr0teinA-1、a1-antichymotrypsinなどの血清蛋白質は糖尿病網膜症でのピーク強度が黄斑円孔のピーク強度に比べ約20倍であった。これらの蛋白質はピーク強度比より糖尿病網膜症において黄斑円孔に比べ約20倍の量で存在していることが示された。2次元電気泳動でのプロテオーム解析の結果と一致した。(2)硝子体特有の蛋白質Prostaglandin-D2 synthase、nterphotoreceptor retinoid binding-protein、Plasma glutathione peroxidaseは糖尿病網膜症と黄斑円孔では同程度のピーク強度であり、これらの蛋白質は糖尿病網膜症、黄斑円孔とも同量存在していることが示された。2次元電気泳動でのプロテオーム解析の結果と一致した。(3)新たな蛋白質の同定これまでのプロテオーム解析では同定できなかったVascular endothelial growth factor(VEGF)、Fibroblast growth factor(FGF)を糖尿病網膜症で同定した。VEGF、FGFは糖尿病網膜症の発症、増悪に強く関与しているとされている。しかし黄斑円孔では同定できず、ピーク強度の比較ができなかった。微量な蛋白質の定量的な測定を目標とし、2次元電気泳動を用いた方法より、感度を上昇することが可能であった。しかし全ての蛋白質が定量化できず、現時点で臨床応用には難しいと思われる。

This year, the diazepam analyzer is used to analyze the accuracy, high sensitivity and high sensitivity of the quantitative analyzer. The Department of Science Studies, Graduate School of Science, University of Science and Technology, provides information on how to receive Lys studies, 3H4NBAS programs, and SHIMADZU programs. The main results are as follows: (1) Serum albumin, Transthyretin, a1-antitrypsin, Hemopexin, Apolpopr0teinA-1, a1-antichymotrypsin, serum albumin, diabetic retinopathy, macular hole, macular hole and macular hole were detected. The protein is about 20 times stronger than the diabetic macular hole in the diabetic network. The results of 2-D electrophoretic electrophoresis are consistent with each other. (2) the specific proteins of nitrate, Prostaglandin-D2 synthase, nterphotoreceptor retinoid binding-protein, Plasma glutathione peroxidase, macular hole, macular hole and macular hole. The results of 2-D electrophoretic electrophoresis are consistent with each other. (3) the new protein profile was similar to that of Vascular endothelial growth factor (VEGF) and Fibroblast growth factor (FGF). VEGF, FGF diabetic network disease syndrome, diabetes stress syndrome and diabetes mellitus syndrome. The macular hole has the same strength and strength as the macular hole. The quantitative determination of microalbuminuria, the determination of the target value, the determination of two-dimensional swimming, the determination of trace protein, the determination of microalbuminuria, the determination of trace protein, the determination of microalbuminurium, the determination The whole protein was used for quantitative analysis, and the time-to-time table was used for quantitative analysis.