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歯周病細菌の病原性株に特異的な遺伝子群の解析

牙周细菌致病菌株特异性基因分析

基本信息

批准号：
17791582
负责人：
吉田明弘
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Kyushu Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791582/
关键词：
Porpbyromonas gingivalis 歯周炎 subtractive hybridization バイオフィルム Porphyromonas gingivalis

项目摘要

歯周病細菌の1つとして注目されているPorpbyromonas gingivalis(Pg)の菌株間における病原性は多様であり、病原性の強い株と弱い株が存在することは知られているが、これらめ病原性の違いを規定する遺伝子群は決定されていない。本研究では同細菌の菌株特異的な遺伝子領域とそれらの病原性の違いについて解析し、それらの遺伝子領域と病原性およびバイオフィルム形成能との関係を調べた。PgW83株に特異的な遺伝子領域をATCC33277株とsubtractive hybridization法を用いて比較することにより同定した。同法によって得られたW83株に特異的な遺伝子を薬剤耐性遺伝子で挿入失活した変異株を作製した。さらに変異株と親株について、ポリ塩化ビニルプレート上におけるバイオフィルム形成能の違いについて解析した。Subtractive hybridization法を用いて575個のコロニーが得られ、そのうち32個のPgW83株に特異的なDNA断片が得られた。そのうち3種類において変異株を作製した。変異株のうち、ヒスチジンキナーゼに関与する遺伝子のパイオフィルムの形成量が他の菌に比べて少ないことが明らかになった。さらにヒスチジンキナーゼ関連遺伝子を欠失した変異株をBALB/cマウスに接種したところ、W83株を接種した場合と比べて生存率が高くなった。このことからヒスチジンキナーゼ関連遺伝子のバイオフィルム形成能と病原性の間に関係があることが示唆された。

Among the strains of Porpbyromonas gingivalis(Pg), pathogenic strains vary, strong and weak pathogenic strains exist, and pathogenic subgroups are determined. In this study, we investigated the relationship between the pathogenicity of different strains of bacteria and their pathogenicity. PgW83 strain was identified by the subtractive hybridization method in the specific subdomain ATCC33277 strain. The same method was used to obtain W83 strain, which was a specific strain, and to control the inactivation of the resistant strain. In addition, there are different strains and parent strains, which can be analyzed in different ways. Subtractive hybridization method was used to detect 575 DNA fragments and 32 DNA fragments specific to PgW83 strains. The three kinds of plants are controlled by different plants. The amount of heterotrophic plants formed is less than that of other bacteria. The survival rate of BALB/c and W83 strains was higher than that of other strains. The relationship between pathogenicity and genetic diversity is discussed.