ヒト細胞における大気浮遊粒子由来物質による突然変異の定量的解析と分子機構の解明

空气颗粒物引起人体细胞突变的定量分析及分子机制的阐明

基本信息

批准号：
17710047
负责人：
川西優喜
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Osaka Prefecture University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17710047/
关键词：
TLS DNA複製大気汚染物質 DNA付加体多環芳香族 DNA損傷突然変異

项目摘要

大気浮遊粒子状物質由来のDNA付加体を部位特異的に1箇所もつプラスミドを作製し、ヒト培養細胞内で複製させ、TLSの頻度と突然変異パターンを明らかにすることを目的に実験を実施した。最終的には付加体ごとに付加体1分子あたりのTLS頻度や突然変異誘発率を比較する。今回解析を終えDNA付加体は、化石燃料燃焼で生成しタバコ煙にも含まれ膀胱癌を起こす4-アミノビフェニルの付加体(dG-ABP)である。がん抑制遺伝子p53のコドン248は、膀胱癌で見つかるp53変異のホットスポットであり、またABP付加のホットスポットでもある。コドン248の周辺配列を複した塩基配列上のdG1箇所のみdG-ABPにかえた部位特異的修飾プラスミドをヒト細胞に導入し、生じたTLSの頻度を変異パターンを調べた。その結果、このdG-ABP修飾プラスミドのTLS率は36%であることがわかった。以前の大腸菌を用いた実験結果から大腸菌でのTLS率は80%であったので、dG-ABPはヒト細胞において強く複製阻害をすることがわかった。またTLSしたプラスミドの塩基配列を調べたところ約5%の娘プラスミドに突然変異が生じていた。変異の内訳は修飾部でのGからTへのトランスパージョンが4、GからCへのトランスパージョンが2、GGからTAへのタンデム置換が1、修飾部の1塩基下流でのGからAへのトランジションが1、修飾部の2塩基下流でのAからCへのトランスパージョンが1個であった。

进行了一个实验，以产生一种质粒，该质粒具有一个位点特异性的DNA加合物，该质粒源自空气颗粒物，在人培养细胞中复制，并阐明TLS和突变模式的频率。最后，我们比较每个加合物的每加合物的TLS频率和诱变率。完成此分析后，DNA加合物是4-氨基苯基加合物（DG-ABP），它是由化石燃料燃烧产生的，也发现在烟草烟雾中并引起膀胱癌。癌症抑制基因p53的密码子248是在膀胱癌中发现的p53突变的热点，也是ABP添加的热点。将特异性修饰的质粒转移到人类细胞中，取代了核苷酸序列上的DG1位置，该核苷酸序列重叠了密码子248的外围序列，并检查了突变模式的突变模式，以产生的TLS的频率。结果表明，该DG-ABP修饰的质粒的TLS速率为36％。使用大肠杆菌的先前实验结果表明，DG-ABP强烈抑制人类细胞的复制，因为大肠杆菌的TLS速率为80％。此外，当检查了基于TLS的质粒的碱基序列时，将大约5％的子质粒突变。在修饰部分的G-T换载突变为4，对于G-C转移2，G-TA串联替代为1，G-T转型为1，1用于G-A转变1个修饰部分下游的一个碱基为1，而A-C对于修改部分下游的两个底座的A-C转移。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

New Developments in Mutation Research

突变研究的新进展

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kawanishi;M
通讯作者：
M

Identification of three major DNA adducts formed by the carcinogenic air pollutant 3-nitrobenzanthrone in rat lung at the C8 and N2 position of guanine and at the N6 position of adenine

DOI：
10.1002/ijc.21622
发表时间：
2006-05-01
期刊：
INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER
影响因子：
6.4
作者：
Arlt, VM;Schmeiser, HH;Takamura-Enya, T
通讯作者：
Takamura-Enya, T

Establishment of Reporter Yeasts for Guinea Pig and Syrian Hamster Aryl Hydrocarbon Receptor Ligand Activity

DOI：
10.3123/jemsge.28.167
发表时间：
2006-11
期刊：
Genes and Environment
影响因子：
1.7
作者：
M. Kawanishi;Michiyo Sakamoto;Chiaki Shimohara;T. Yagi
通讯作者：
M. Kawanishi;Michiyo Sakamoto;Chiaki Shimohara;T. Yagi

Translesion DNA synthesis across mono ADP-ribosylated deoxyguanosine by Y-family DNA polymerases, in New Developments in Mutation Research

Y家族DNA聚合酶跨单ADP核糖基化脱氧鸟苷的跨损伤DNA合成，突变研究的新进展

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
影响因子：
0
作者：
M.Kawanishi;K.Matsukawa;E.Ohashi;T.Takamura;Y.Totsuka;M.Watanabe;T.Sugimura;K.Wakabayash;F.Hanaoka;H.Ohmori;T.Yagi
通讯作者：
T.Yagi

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川西優喜其他文献

Continuous field survey of environmental estrogens (EEs) pollution and study on combined effects of EEs and pharmaceuticals on fish reproduction

环境雌激素（EEs）污染连续实地调查及EEs和药物对鱼类繁殖的综合影响研究

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
坪平理;植嶋亜衣;久富優太;小田美光1;恒松雄太;佐藤道大;平山裕一郎;三好規之;岩下雄二;吉川悠子;椙村春彦;戸塚ゆ加里;八木孝司;若林敬二;渡辺賢二;川西優喜;Kiyoshi Soyano and Masaki Nagae
通讯作者：
Kiyoshi Soyano and Masaki Nagae