神経伝達物質放出の同期性を担うシナプトタグミン1とSNARE複合体の結合の役割

突触结合蛋白 1 和 SNARE 复合物结合在神经递质释放同步中的作用

• 批准号: 18800027
• 负责人: 西木 禎一
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18800027/
• 关键词: シナプス伝達; 神経伝達物質; カルシウムイオン; シナプトタグミン; シンタキシン; 神経伝達物質放出; SNARE

シナプス小胞の開口放出は、カルシウムセンサーの最有力候補シナプトタグミン1と、膜融合装置SNAREによって引き起こされると考えられているが、「どのようにしてシナプトタグミン1がSNAREによる膜融合を引き起こすのか」は不明である。シナプトタグミン1とSNAREの一つであるシンタキシン1の結合の生理的意義を明らかにする目的で、本年度は両者の結合の生化学的性状を調べシンタキシン1のシナプトタグミン1結合部位を同定し、その部位の変異が伝達物質放出に及ぼす影響を検討した。ラット脳から可溶化したタンパク質を免疫沈降したところ、シナプトタグミン1とSNAREとの結合が観察され、その結合量はカルシウムイオン(Ca^<2+>)の有無で差がなかった。組替えタンパク質同士での結合実験においても、脳から可溶化した場合と同様にCa^<2+>非依存性の結合が観察された。これらの結果は、Ca^<2+>流入前の神経終末においてシナプトタグミン1がSNAREに直接結合する可能性を示しており、我々の仮説を支持する。次に、シナプトタグミン1との結合に関わるシンタキシン1の領域を明らかにするために、カルボキシル末端に点在するグルタミン酸(E)あるいはアスパラギン酸(D)に着目し、それぞれをグルタミン(Q)あるいはアスパラギン(N)に置換した。E224Q/E228Qの二重変異を導入したシンタキシン1ではシナプトタグミン1への結合が消失した。このことから、シナプトタグミン1への結合にはシンタキシン1の224番目と228番目のグルタミン酸が重要であることが明らかとなった。E224Q/E228Q変異シンタキシン1を初代培養神経細胞に発現させ、神経伝達物質放出に対する影響を電気生理学的に解析した。

The opening of the microcell, the most powerful waiting device, the membrane fusion device, the SNARE fusion device, and the membrane fusion device, the membrane fusion device and the membrane fusion device. The meaning of the combination of physiology is to understand the meaning of the physiology, and the biochemical characteristics of the people of this year and the biochemical characteristics of the people of this year are the same as those of biochemistry. The results show that there are no significant differences in the immune response between the immune system and the immune system. The results show that there is no difference between the immune system and the immune system. The results show that there is no difference between the immune system and the immune system. The results show that there is no difference in the amount of SNARE in the immune system. Tissue replacement compounds were used in combination with chemical compounds, soluble compounds, calcium ^ and lt;2+>-independent compounds. The result of the experiment, the inflow of Ca ^ & lt;2+> into the last part of the world shows that the possibility of the combination of the possibility and the possibility of the inflow of CAC ^ & lt;2+> will show that we will support the situation. In the second half of the day, in the first half of the year, in the first place, in the middle of the day, in the first place, in the first place, in the first place. The E224Q/E228Q has a double entry point. The first one is called vanishing. The other is the missing one. Please tell me how to make sure that you are aware of the importance of acid in the first place. In the early days of the E224Q/E228Q program, the computer system was used to analyze the physiology of computer science.

项目成果

Ca^<2+>-binding to synaptotagmin I regulates spontaneous neurotransmitter release

Ca^<2>-与突触结合蛋白 I 结合调节自发神经递质释放

• 发表时间: 2008
• 作者: K.Kashibuchi;T.Taleb;A.Jamalipour;Y.Nemoto;N.Kato;二村 智康;嶋田 光洋;嶋田 光洋;二村 智康;深田 宗一朗 等;池本 円 等;深田 宗一朗 等;鈴木 直輝 等;辻川 和丈 等;林 芳紀;David Isracli 等;林 芳紀;深田 宗一朗 等;Tei-ichi Nishiki
• 通讯作者: Tei-ichi Nishiki