糸状菌セルラーゼ潰伝子発現誘導機構に謁する分子生物学的研究

丝状真菌纤维素酶基因表达诱导机制的分子生物学研究

• 批准号: 18880022
• 负责人: 谷 修治
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Osaka Prefecture University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18880022/
• 关键词: セルラーゼ遺伝子; 遺伝子発現制御; Aspergillus aculeatus; バイオマス; 環境応答; cbhI; セルラーゼ; 遺伝子発現誘導; 糸状菌; 分子生物学

本研究では、糸状菌(Aspergillus acuieatus)におけるセルラーゼ遺伝子発現誘導機構を解明する事を目的として、まず、セルロースに応答してセロビオハイドロラーゼ遺伝子(cbhI)を発現誘導するシスエレメントを同定する事を目指した。種々の5'欠損ブロモーターの遺伝子発現誘導能をGUS遺伝子をレポーターとして解析した結果、翻訳開始点の上流467bpまでの欠損は遺伝子発現誘導能には影響を与えなかった。しかし、360bpまでの欠損で発現誘導能が約1/10に減少し、更に、191bpまでの欠損で消失した。そこで、影響の見られた領域に部位特異的変異を導入して詳細に解析した結果、-360〜-191間に存在する二カ所のシスエレメントが発現誘導に必要である事が明らかになった。その二カ所に共通な配列は、CCGN_2CCN_7GAであり、A.nidulans eglA遺伝子発現誘導に必須なシスエレメントと類似の配列である事が示された。この保存配列は、A.aculeatus cbhIプロモーター上の-467〜-360間にもう一カ所存在する事から、現在この領域にも部位特異的変異を導入し、改変プロモーターの遺伝子発現誘導能を解析中である。以上の解析により得られた知見を基に、同定されたシスエレメントを介した遺伝子発現誘導に関わる因子のスクリーニング系を現在構築しており、今後、糸状菌のセルラーゼ遺伝子発現誘導を調節する因子の同定に繋がるものと期待する。

This study で で, Aspergillus Acuieatus) に お け る セ ル ラ ー ゼ posthumous son 伝 発 now induced institutional を interpret す る matter を purpose と し て, ま ず, セ ル ロ ー ス に 応 answer し て セ ロ ビ オ ハ イ ド ロ ラ ー ゼ heritage 伝 child (cbhI) を 発 now induced す る シ ス エ レ メ ン ト を with fixed す る matter を refers し た. Kind of 々 の 5 'owe loss ブ ロ モ ー タ ー の heritage 伝 son 発 now can induce を GUS heritage 伝 son を レ ポ ー タ ー と し て parsing し た results, 訳 start point の high-class 467 bp ま で の owe loss は heritage 伝 son 発 now can induce に は influence を and え な か っ た. し か し, 360 bp ま で の owe loss で 発 is about 1/10 of that can induce が に し, more に, 191 bp ま で の owe loss disappear で し た. そ こ で, influence の see ら れ に た field site specific - different を import し て detailed analytical し に た result, - 360 - - 191 に す る second カ の シ ス エ レ メ ン ト が 発 now induced に necessary で あ る matter が Ming ら か に な っ た. そ の second カ に な column は, common CCGN_2CCN_7GA で あ り, A.n idulans eglA posthumous son 伝 発 induced に must now な シ ス エ レ メ ン ト と similar の match column で あ が る things in さ れ た. こ の save column は, A.a culeatus cbhI プ ロ モ ー タ ー の - 467 - - 360 between に も う existing a カ す る matter か ら, now こ の field に も site specific - different を import し, change - プ ロ モ ー タ ー の heritage 伝 child 発 now can induce を analytic で あ る. Above analytical に の よ り have ら れ た knowledge を に, with fixed さ れ た シ ス エ レ メ ン ト を interface し た heritage 伝 son 発 now induced に masato わ る factor の ス ク リ ー ニ ン グ department を now build し て お り bacteria, in the future, si の セ ル ラ ー ゼ heritage 伝 son 発 now induced を adjustment す る factor の be に 繋 が る も の と expect す る.

项目成果

Aspergillus aculeatusにおけるsC選択マーカを用いた形質転換系の構築

使用棘孢曲霉中的 sC 选择标记构建转化系统

• 发表时间: 2007
• 作者: Nishikawa Y;Kawase O;Vielemeyer O;Suzuki H;Joiner K.A;Xuan X;Nagasawa H.;Yusuke Takehana;Yusuke Takehana;Keita Tanaka;Takehana Yusuke;竹花 佑介;足立 浩美
• 通讯作者: 足立 浩美