ヒラメの変態における甲状腺ホルモンレセプター下流の分子機構の解明

牙鲆变态过程中甲状腺激素受体下游分子机制的阐明

• 批准号: 18880012
• 负责人: 芳賀 穣
• 金额: $ 1.74万
• 依托单位: Tokyo University of Marine Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18880012/
• 关键词: 変態; 甲状腺ホルモン; ヒラメ; 受容体

前年度に引き続き既報の甲状腺ホルモン代謝酵素タイプ1-3(DI1-3)の配列を参考にして、digenerateなプライマーを設計し、ヒラメDI1-3の単離を試みた。複数のプライマーを設計し、アニーリングの温度などの条件を変えてPCRを行ったが、予想されるサイズのPCR産物を得ることができなかった。そこで、まずヒラメ甲状腺ホルモン受容体〓および〓の発現解析を行うこととした。ヒラメ稚魚の各組織から、定法により全RNAを抽出し、市販のキットを用いてcDNAを作成した。ジーンバンクに登録されているヒラメ甲状腺ホルモン受容体〓および〓の配列を参考にして、相補的な配列を持ったプライマーを設計し、ヒラメ稚魚の筋肉、肝臓、鰓、胃、脳、眼球および変態後期(Gステージ)および変態終期(Iステージ)の全魚体における発現パターンをPCRにより調べると、全ての組織および変態期の全魚体について発現が見られた。また、〓サブタイプの発現レベルはαサブタイプのそれよりもやや高い傾向が認められた。次に、ヒラメ仔魚の変態の進行に伴う甲状腺ホルモン受容体の発現変動を調べるため、水産総合研究センター宮古栽培漁業センターにて飼育されたヒラメ仔魚(A-I各ステージ)を採取して、凍結保存し、RT-PCRによる発現解析に供した。前年度の結果と合わせると、変態完了後のヒラメ稚魚では、筋肉、胃、眼球および肝臓において、ヒラメレチノイドX受容体をパートナーとした二量体として機能する可能性が示唆された。本年度の研究により、ヒラメの変態現象に伴う甲状腺ホルモン関連受容体の機能に関する基礎データが得られた。

In the previous year, the reported thyroid metabolic enzymes 1-3(DI1-3) were listed as reference, digenerate design, and DI1-3 isolation tests. The PCR product was obtained by changing the temperature of the PCR product. The analysis of the occurrence of thyroid gland receptor and thyroid gland receptor is carried out. The whole RNA was extracted from the tissues of juvenile fish, and the cDNA was prepared by sequencing. The whole fish body development of juvenile fish muscle, liver, gills, stomach, eyeball and late stage (G stage) and terminal stage (I stage) is regulated by PCR The whole body of the fish is in a state of transition.また、〓サブタイプの発现レベルはαサブタイプのそれよりもやや高い倾向が认められた。In addition, the development of larval status is accompanied by the regulation of thyroid gland receptor development and aquaculture research. The development of larval status is accompanied by the adoption, freezing and preservation, and RT-PCR analysis. The results of the previous year showed the possibility of the fish's muscle, stomach, eyeball and liver function. This year's research on thyroid and thyroid related receptor functions has been carried out.