虚血耐性・冬眠・老化予防関連チロシン残基リン酸化蛋白質の同定

鉴定与缺血耐受、冬眠和预防衰老相关的酪氨酸残基磷酸化蛋白

• 批准号: 18890123
• 负责人: 大槻 俊輔
• 金额: $ 1.07万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890123/
• 关键词: 虚血耐性; 脳神経; 遺伝子発現; 冬眠; チロシンリン酸化蛋白質; 老化; チロシンリン酸化

本年度までに、ラット局所脳虚血モデルを用いて、脳神経における"虚血耐性ischemictolerance"現象獲得に関与すると思われる遺伝子発現のスクリーニングを実施した。1.内頚動脈頂点をナイロン糸で作成した塞栓子で一時的に閉塞し、中大脳動脈領域に限局した虚血侵聾を再現性良く作成した。大脳半球に部分的梗塞巣が形成され、残存部にはより強い虚血侵襲に対して抵抗性を獲得する"虚血耐性"現象が獲得される。この脳組織の虚血24時間後における遺伝子発現をサブトラクションPCR法によりプラスミドライブラリーを作成し検討した。2.1050クローンをリバース・ノザン解析により一次検定し、111クローンをダイターミネーター法で塩基配列を調べ、ホモロジー解析後、poly(A)RNA・ノザン解析による2次検定を行い、最終的に48クローンを真陽性と確定した。3.このクローンはheat shock protein 70, rho C, heat shock protein 72, KIAA 82,chromogranin B,GFAP, synaptojanin, FGF antagonist-sprouty, poly (A) binding protein, heat shock protein 86と同定された。4.これらの遺伝子群は、いわゆるストレス蛋白質、シナプス機能調節蛋白質、増殖分化に関与する蛋白質をコードするものである。局所脳虚血のみならず前脳虚血やてんかんなどの虚血耐性を誘導しうる侵襲後の脳に再現性良く発現した。このような遺伝子発現スクリーニングの結果を踏まえて、各蛋白質レベルでのチロシン残基リン酸化を評価すべく、アミノ酸リン酸化解析や抗リン酸化チロシン抗体アフィニティカラムを用いたスクリーング作業を継続したい。また、本研究の最終目標は、冬眠における虚血・低温・飢餓状態における生体の耐性現象獲得や生存の分子機序解明である。冬眠の誘導と維持における分子機序解明は、宇宙開発・惑星間移動のみならず、極端な地球気象環境の変化に対する人類の適応のため必要であると考える。

This year's までに、ラットbureau脳deficiency bloodモデルを用いて、脳神経における"deficiency blood tolerance ischemic "Tolerance" phenomenon is obtained through the relationship between tolerance and tolerance. 1. The apex of the internal artery is blocked and the embolus is temporarily blocked, and the area of ​​the middle and large arteries is limited and the blood loss is deafening, and the reproducibility is good. The formation of infarction in the large hemisphere is difficult, and the remaining part is strong and resistant to the invasion of blood deficiency, and the phenomenon of "blood deficiency resistance" is acquired. After 24 hours of blood deficiency in the tissue, the patient's condition is revealed. The ョンPCR method is a によりプラスミドライブラリーをし検した. 2.1050クローンをリバース・ノザンanalyticsにより一検定し, 111クローンをダイターミネーター法で塩based arrangementを Adjustmentべ, After the analysis of ホモロジー, poly(A)RNA・ノザン analysis was carried out twice, and the final result of に48クローンをtrue positive was confirmed. 3. このクローンはheat shock protein 70, rho C, heat shock protein 72, KIAA 82, chromogranin B, GFAP, synaptojanin, FGF antagonist-sprouty, poly (A) binding protein, heat shock protein 86と同定された. 4. これらの缝子群は, いわゆるストレスprotein, シナプスfunction It regulates proteins, proliferation and differentiation, and protein をコードするものである. The place where the disease is caused by the blood deficiency is the resistance of the blood deficiency before the blood deficiency is induced, and the reproducibility of the disease after the invasion is good.このような缝子発appearsスクリーニングのRESULTSをstepまえて, each protein レベルでのチロシン residue リン acidification evaluation 価すべく, Aminanoic acid リン acid analysis and anti-リン acidated チロシン antibody アフィニティカラムを用いたスクリーングjob を継続したい. The ultimate goal of this study is to understand the molecular mechanism of hibernation, the phenomenon of resistance to blood deficiency, hypothermia, and starvation, and the survival of the organism. The explanation of the sequence of molecular machines for the induction and maintenance of hibernation, the development of the universe and the movement between planets , Extreme changes in the earth's climate environment are necessary and necessary for human beings.